一种超滤管电洗脱装置及应用研究.pdfVIP

第２９卷　第４期 北京生物医学工程 Ｖｏｌ．２９　Ｎｏ．４ ２０１０年　８月 ＢｅｉｊｉｎｇＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ａｕｇｕｓｔ　２０１０ 一种超滤管电洗脱装置及应用研究 １ １，２ 朱智强 　牛勃 摘　要　目的 介绍一种自制超滤管电洗脱装置的制作方法，并与其他洗脱方法进行比较。方法 以超滤管离心管、滤网和海绵制作成超滤电洗脱装置。待分离的蛋白样品用非变性聚丙酰胺凝胶电泳 分离后染色、切胶、碎胶后，分别用上述自制超滤电洗脱装置、被动洗脱法和半透膜电洗脱法回收凝胶中 的蛋白样品，再通过超滤离心进行脱盐浓缩。最后用 Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定样品浓度，并比较三种洗脱方法的 洗脱效率。结果 超滤管电洗脱、被动洗脱和半透膜电洗脱分成 ０．５ｇ和５ｇ两组，以三种电洗脱法的 μ μ 蛋白回收率依次为：０．５ｇ组 ８２％、４４％、４６％；５ｇ组 ７７％、５８．６％、６３．６％。结论 用超滤管自制的电 μ μ 洗脱装置制作简单方便，其回收效率比被动扩散法和半透膜电洗脱法高，特别适用于小量蛋白样品的回 收。 关键词　电洗脱；超滤；被动扩散法；半透膜电洗脱法 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－３２０８．２０１０．０４．１６． 中图分类号　Ｒ３１８．６　　　文献标志码　Ａ　　　文章编号　１００２－３２０８（２０１０）０４－０３９９－０３ ＡｎＵｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎＴｕｂｅＥｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎＤｅｖｉｃｅａｎｄＩｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ １ １，２ ＺＨＵＺｈｉｑｉａｎｇ，ＮＩＵＢｏ １ＣａｐｉｔａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｅｄｉａｔｒｉｃｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００２０； ２ＯｆｆｉｃｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈａｎｘｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００１ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｐｕｒｐｏｓｅ　 Ｔｏｐｒｅｓｅｎｔｔｈｅｆａｃｔｕｒｅｏｆａｓｅｌｆｍａｄｅｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｔｕｂｅｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎｄｅｖｉｃｅ ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｗｉｔｈｐａｓｓｉｖｅｅｌｕｔｉｏｎａｎｄｓｅｍｉｐｅｒｍｅａｂｌｅｍｅｍｂｒａｎｅｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　 Ｆｉｓｔｌｙｏｎｅ ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｔｕｂｅｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎｄｅｖｉｃｅｗａｓｃｏｎｆｉｇｕｒｅｄｗｉｔｈａｎｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｔｕｂｅ，ｆｉｌｔｅｒａｎｄｓｐｏｎｇｅ．Ｔｈｅｎｗｅ ｉｓｏｌａｔｅｄｔｈｅｔａｒｇｅｔｐｒｏｔｅｉｎｂｙｎｏｎｄｅｎａｔｕｒｉｎｇｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ｃｕｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｇｅｌｓｔｒｉｐｓ，ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｅｄｔｈｅｍｂｙｔｈｒｅｅｅｌｅｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｔｕｂｅｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎ，ｐａｓｓｉｖｅｅｌｕｔｉｏｎａｎｄｓｅｍｉ ｐｅｒｍｅａｂｌｅｍｅｍｂｒａｎｅｅｌｅｃｔｒｏｅｌｕｔｉｏｎ．Ａｆｔｅｒｔｈａｔｗｅｅｎｒｉｃｈｅｄａｎｄｄｅｓａｌｔｅｄｔｈｅｓａｍｐｌｅｂｙｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ．Ｆｉｎａｌｌｙ， ｕｓｉｎｇＢｒａｄｆｏｒｄｍｅｔｈｏｄｗｅｄｅｔｅｃｔｅｄｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄａｓｓｅｓｓｅ