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第一章 色谱分析基础 第一节 色谱法概述 一、 色谱法的特点、分类和作用 色谱法 2.色谱法分类 液相色谱 (3)其他色谱方法 3.色谱法的特点 二、色谱分离过程 1. 气相色谱分离过程 2. 分配系数（ partion factor） K 分配系数 K 的讨论 3.分配比 （partion radio）k 4. 容量因子与分配系数的关系 5. 分配比与保留时间的关系 三、色谱流出曲线与术语 （2）用体积表示的保留值 3. 相对保留值r21 4. 区域宽度 5. 色谱流出曲线的数学描述 * * 一、 色谱法的特点、分类和作用 characteristic ,classification actuation of chromatograph 二、气相色谱分离过程 separation process of gas chromatograph fundamental of chromatograph analysis generalization of chromatograph analysis 1.概述 混合物最有效的分离、分析方法。 俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置： 色谱原型装置，如右图所示。 色谱法是一种分离技术， 试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 色谱法的发展过程 1906年—茨维特发现最初的色谱柱 1944年—Martin提出薄层色谱法和柱色谱法 1952年—马丁和辛格成功研制了气-液色谱法，提出塔板理论概念，获得诺贝尔奖 1957年—戈雷发明了毛细管柱，分离效率显著提高 50年代末—霍尔姆斯，GC-MS，近代分析发展的重要标志 1962年—Porath，葡聚糖凝胶分离水溶性高分子，凝胶渗透色谱法 60年代末—高压技术、高效固定相、检测技术的发展，高效液相色谱的发展 70年代—高效液相色谱成为强有力的分析手段 色谱分类 在色谱分析中，有固定相和流动相。 流动相：指色谱过程中携带组分向前移动的物质。 固定相：指色谱过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面上的液体。 按两相状态分类： 液-固色谱：流动相为液体，固定相为具有吸附活性的固体； 液-液色谱：流动相为液体，固定相为附于载体表面的液体； 气-固色谱：流动相为气体，固定相为具有吸附活性的固体； 气-液色谱：流动相为气体，固定相为附于载体表面的液体。 色谱分类 按色谱过程的机理分类： 吸附色谱：以吸附剂为固定相，利用吸附剂对不同组分吸附力的强弱差异进行分离的过程； 分配色谱：以液体作为固定相，根据各组分在两相中溶解度的不同进行分离的过程； 离子交换色谱：用一种能交换离子的材料作为固定相，根据各组分的离子交换能力的差异进行分离的色谱过程；用于无机离子、生物化学中各种核酸衍生物、氨基酸等的分离； 凝胶色谱：固定相为一种分子筛或凝胶，根据各组分分子的大小差异进行分离的方法。 按固定相的性质分类： 柱色谱法： 填充柱色谱：将固定相装于色谱住内；内径为2-6mm，长几米； 开管毛细管柱色谱：将固定液涂于毛细管内壁上，内径为0.2—0.5 m； 薄层色谱；将固定相涂布在薄板上形成均匀的薄层。 纸色谱法：以纸为载体，以纤维上吸附的水为固定相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础 (1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。 按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； 按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱 (2)液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。 按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。 薄层色谱和纸色谱： 比较简单的色谱方法 凝胶色谱法：测聚合物分子量分布。 超临界色谱: CO2流动相。 高效毛细管电泳: 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物