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第二章 基因工程与食品产业 第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的原理及基本技术 第三节 基因工程在食品工业中的应用 第二章 基因工程与食品产业 第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的原理及基本技术 第三节 基因工程在食品工业中的应用 第一节 基因工程概述 一、基因工程的概念及发展 1、基因工程(gene engineering): 所谓基因工程,就是利用DNA体外重组或扩增技术从供体生物基因组中分离感兴趣的基因或DNA片段,或是经过人工合成的方法获得基因,然后经过一系列切割,加工修饰,连接反应产生重组DNA分子,再将其转入适当的受体细胞,以期获得基因表达的过程。 基因工程(gene engineering)常和以下名称混用: 遗传工程(genetic engineering); 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique); 克隆(clone): 作名词时是指含有某目的DNA片段 的重组DNA分子或含有该重组分子 的无性繁殖系。作动词时是指基 因的分离与重组过程。 2、基因工程的发展概况 历史回顾: 70年代初,DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达 。今天,人们在超市货价上可以买到保质期很长的转基因土豆,“多利”克隆绵羊走进实验室,基因工程正在使整个人类生活方式发生重大变革。 2000.6.26宣告人类基因组“工作框架图”绘制完毕。 目前还有许多有价值的微生物,动物,植物的测序工作正在进行中。 人类基因组计划 这一价值30亿美元的计划旨在对人类基因组进行精确测序,发现所有人类基因并确定其在染色体上的位置,明确所有基因的结构和功能,破译人类全部遗传信息,使人类能够在分子水平上全面认识自我。 2000年,法国科学家利用基因技术“制造”出了一只可以发出绿色荧光的兔子“Alba”。应用了受精卵显微注射技术,从水母身上采集了荧光蛋白,基因改良后,使它的发光率比原先提高了两倍,再将该基因植入到了兔子的受精卵中,由此培养出了会发光的兔子Alba。 二、工具酶和基因载体 1、基因工程的工具酶 限制性内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 碱性磷酸酯酶 S1核酸酶 逆转录酶 限制性内切酶(RE表示) 分类: 第二章 基因工程与食品产业 第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的原理及基本技术 第三节 基因工程在食品工业中的应用 第二章 基因工程与食品产业 第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的原理及基本技术 第三节 基因工程在食品工业中的应用 (3)选择、修饰和重组核糖体结合位点及密码子等mRNA的翻译 调控原件,强化受体细胞中蛋白的生物合成过程。这些涉 及到基因表达调控的分子生物学原理。 (4)基因工程菌(细胞)是现代生物工程中的微型生物反应 器,在强化并维持其最佳生产效能的基础上,从工程菌 (细胞)大规模培养的工程和工艺角度切入,合理控制微 型生物反应器的增值速度和最终数量,也是提高外源表 达产物产量的主要环节,这里涉及的是生物化学工程学 的基本理论体。 二、基因工程基本技术 基因工程主要内容 基因工程的实现主要分为四个步骤: 第一步:目的基因的分离或制备:人工分离生物基因组群中 目的基因及内切酶定位切 割或人工酶促合成; 第二步:重组DNA:选择载体及目的基因与载体基因重组; 第三步:导入与表达:重组DNA导入受体细胞,目的基因表 达出目的效应和性状; 第四步:筛选、鉴定:筛选、鉴定出含有外源目的基因的菌 体或个体。 (1)从供体细胞中分离出基因组DNA,用限制性核酸内切酶 分别将外源DNA(包括外源基因或目的基因)和载体分 子切开(简称“切”); (2)用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片断接到载体
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