第10章 紫外吸收和荧光光谱法.pptVIP

紫外可见分光光度法 紫外吸收光谱的产生 有机化合物的紫外吸收光谱 无机化合物的紫外吸收光谱 紫外-可见分光光度计 分析条件的选择 紫外-可见分光光度的应用 第一节.紫外吸收光谱的产生 分子内能量总和: E分子=E电+E振+E转 ?E电 ?E振 ?E转 2.物质对光的选择性吸收及吸收曲线 吸收曲线的讨论： 3.紫外可见光谱的特点 1. 灵敏度高 通常，待测物质的含量1～10-5％时，能够用分光光度法准确测定。所以它主要用于测定微量组分。 2. 应用广泛 几乎所有的无机离子和许多有机化合物可以用分光光度法进行测定。如土壤中的氮、磷以及植物灰、动物体液中各种微量元素的测定。 第二节.有机化合物紫外－可见吸收光谱 有机化合物中的单键电子称为σ键电子，双键电子称为 π键电子，孤对电子称为n电子。 它们吸收能量后跃迁到反键轨道或非键轨道上。即有四种轨道跃迁： σ→ σ* n → σ* n → π* π→ π* 1.σ→σ＊跃迁 2. n→σ＊跃迁 3.π→π＊跃迁 （3）羰基化合物共轭烯烃中的 ? → ?* （4）芳香烃 含有杂原子的双键化合物（如-C=O，-C=N）中杂原子上的n电子跃迁到π*轨道，即分子中含有孤对电子的原子和π键同时存在时，会发生此跃迁，所需的能量小，吸收波长λ＞200 nm，但吸收峰的摩尔吸收系数ε很小，一般为10~100L·mol-1·cm-1。 发色团与助色团 红移与蓝移 饱和烃只有σ键电子，发生σ→σ*跃迁，吸收波长在远紫外区（10-200nm）。 由于小于160nm紫外光被氧气吸收，需要在高真空中进行，因此应用不多。 但是H被O、X、N、S取代后， 发生n→σ*，吸收波长向长方向移动，即红移。使吸收波长向长波长方向移动的杂原子基团称为助色基团，例如－NH2-、－OH、－OR等。 不饱和烃含π键，产生跃迁π→π* 。 不饱和基团是使化合物的最大吸收峰波长移动到紫外可见区域，因此被称为生色团。例如C=O、－COOH等，生色团可发生n →π*、π→π*跃迁。 共轭烯烃各能级间距离较近，电子容易激发，生色作用大为增强。 共轭双键中π→π*跃迁所产生的吸收带叫做K吸收带。强度大，摩尔吸光系数在104。 电荷迁移跃迁 配位场跃迁 d－d、f－f跃迁。ε较小，较少应用于分析。 常用溶剂例如己烷、庚烷、环己烷、二氧六环、水、乙醇等。 部分溶剂，特别是极性溶剂，由 于氢键或本身的偶极距，使得溶 质极性增强。引起：n → π*、 π→ π*吸收带迁移。 引起精细结构的变化。 溶剂选用： －满足溶解下要求极性尽量小 －溶剂的吸收范围不能与实验重叠 1.溶剂极性对最大吸收波长λmax的影响 2.溶剂的极性影响吸收光谱的精细结构 溶剂的极性会影响π→π*和n→π*跃迁。当物质溶解在溶剂中时，溶剂分子将该溶质分子包围，即溶剂化，从而限制了溶质分子的自由转动，使转动光谱消失。溶剂的极性大，使溶质分子的振动受到限制，由振动引起的精细结构也不出现。当物质溶解在非极性溶剂中时，其光谱与该物质的气态光谱相似，可以观测到孤立分子产生的转动-振动的精细结构。 第五节.紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计基本构造 仪器类型 紫外-可见分光光度计基本构造 1.光源 作用：提供能量激发被测物质分子，使之产生 电子谱带 要求 ：发射足够强的连续光谱，有良好的稳定性 及足够的适用寿命 类型：可见与近红外区：钨灯 400～1100nm 紫外区：氢灯或氘灯 180～400nm 2.单色器 作用：从连续光源中分离出所需要的足够窄波段的光束 常用的元件：棱镜、光栅 3.吸收池 功能：用于盛放试样，完成样品中待测试样对光的吸收 常用的吸收池：石英（紫外区） 玻璃（可见区） 吸收池光程：1cm 、2cm、3cm等 4.检测系统 作用：接受、记录信号 组成：检测器、放大器、读数和记录系统 常用检测器： 光电管 蓝敏光电管 210～625nm 红敏光电管 625～1000nm 光电倍增管 5.仪器类型 单光束分光光度计 优点：结构简单，价格便宜 缺点：受光源影响波动大 双光束分光光度计 双光束分光光度计动画示意图 双波长分光光度计 优点 不用参比溶液，只用一个待测试液，直接而完全地扣除背景，从而提高了灵敏度，适合于微量组分的测量。 可进行双组分同时测定而无需解方程 双波长分光光度计示意图 第六节.紫外可见分光光度法应用 定性分析 有机化合物的定性