磁性聚合物微球固定化青霉素酰化酶催化合成6-氨基青霉烷酸.pdfVIP

石 油 化 工 2008年第37卷增刊 H弭ROC砸^ⅡCALTECHNOLOGY ·499· 磁性聚合物微球固定化青霉素酰化酶 催化合成6一氨基青霉烷酸 王居兰，薛屏 (宁夏大学能源化工自治区重点实验室，宁夏银川750021) [摘要]利用反相悬浮聚合技术制备丫亲水性环氧基聚合物磁性微球。微球表面存在着大葺的活性环氧摹团，能够与青霉素酰化 酶(PGA)的氨基产生化学作用，形成了超顺磁性固定化酶微球。制备的磁性微球具有大孔结构和较高的比表面积，同定化酶的载 酶量高，固定化酶在37℃下水解肯霉索G钾合成6一氨基青霉烷酸(6一APA)的表观活性达748IU／g。磁性固定化PGA在磁场 的作用下能快速沉降并与产物分离，防止了同定化酶在使用中的流失，因而具有良好的工业应用前景。 [关键词]磁性微球；亲水性聚合物；同定化青霉素酰化酶；6一氨基青霉烷酸 [中图分类号]TQ028[文献标识码]A 磁性高分子微球是由无机Fe，O。等磁性材料和 制药厂；PGA：浙江顺风海德尔公司。 Shore 有机聚合物复合而成，其功能的多样性和易控性已 磁性微球的磁性能由美国Lake 7304振 引起人们的普遍关注。磁性聚合物微球制备的固 动试样磁强计(VSM)测定，磁场强度范围(一1．6— 定化酶突出的优势是在磁场作用下能有效快速地 Tensor 与反应介质分离；利用外部磁场可控制磁性材料固 采用德国Braker 27红外光谱仪，KBr压片。 定酶的运动方式和方向，替代传统的机械搅拌，能 比表面积、平均孔径和孔体积的测定采用美国Mi— 有效地提高固定化酶的催化效率。6一氨基青霉烷 eromeritcs ASAP2010物理吸附仪，N2吸附质。 酸(6一舰～)是合成半合成口一内酰胺类抗生素的 1．2实验方法 1．2．1 关键中间体，利用青霉素酰化酶(PGA)催化合成 Fe，04的制备 6一APA，生产工艺简便，产品质量高，同时避免了吡 将33．5 gFeCl2·4H20和91．6gFeCl3·6H20 啶等毒性物质的使用，属于环境友好的绿色化生产 溶于2L去离子水中，加热至60℃，搅拌下滴人浓 技术¨．2J。磁性聚合物微球作载体制备的固定化 min后 氨水至pH为9。悬浮液在90℃下熟化30 酶，在磁场力的作用下可快速有效地与产物分离， 进行过滤分离，固体用去离子水洗至中性后在60℃ 从而防止固定化酶在分离及洗涤过程中流失，十分 下烘干，得到Fe，O。磁粉。 适合于工业自动化生产发展的需要。 1．2．2磁性聚合物微球的制备 本工作利用反相悬浮聚合技术，在Fe，O。磁流 在装有恒速搅拌器、冷凝管、温度计和导气管 体存在下，制备了两元和三元聚合物磁性微球，研 的500mL四口瓶中加入庚烷、四氯乙烯和硬脂酸 究了磁性微球固定化PGA合成6一APA的催化 钙一Span60表面活性剂。Fe，O。磁粉用甲酰胺分散 活性。 MBAA和HEMA)混合