徐文宝—不同精粗比日粮对肉牛生产性能影响的研究..doc

吉 林 农 业 大 学 学 士 学 位 论 文 论文题目： 不同日龄鸡法氏囊组织结构的动态观察 姓 名： 马莹聪 专 业： 动物医学专业08级 指导教师： 栾维民 职位： 副院长 2012年5月10日  目 录 目录…………………………………………………………………………………………Ⅰ 题目…………………………………………………………………………………………Ⅱ 摘要及关键词………………………………………………………………………………Ⅱ 1. 前言………………………………………………………………………………1 2． 材料与方法…………………………………………………………………………2 2．1 材料…………………………………………………………………3 2．1.1 实验动物…………………………………………………………………4 2．1.2 主要仪器…………………………………………………………………………5 2．1.3 主要试剂…………………………………………………………………………6 2．2 方法…………………………………………………………………7 2.2.1 实验材料的采取…………………………………………………………………………8 2.2.2 冰冻切片HE染色………………………………………………………………………9 3. 结果与分析……………………………………………………………………………10 3.1 法氏囊组织结构的动态变化…………………………………………11 4. 讨论…………………………………………………………………………………………12 参考文献…………………………………………………………………………………13 致 谢………………………………………………………………………………………14 不同日龄鸡法氏囊组织结构的动态法氏囊被人们确认为禽类特有的中枢免疫器官，是B淋巴细胞最早发生的场所，分化完全的B淋巴细胞由法氏囊迁移到外周淋巴器官中定居、繁衍，并执行重要的免疫功能[5-7]。陈明勇等(2000)研究结果表明，传染性法氏囊病病毒变异E株接种雏鸡后胚胎发育时期法氏囊粘膜上皮肿胀变性法氏囊淋巴滤泡形成延迟或不完整淋巴滤泡内淋巴细胞缺乏或空虚[80]。罗过玲等(1999)研究报道，1日龄接种鸡淋巴细胞性白血病病毒RAV 2株，接毒后1个月法氏囊粘膜固有层间质少几乎全为密集的淋巴滤泡构成滤泡体积大数量多[81]。张贤等(1996)通过对鸡马立克胚胎免疫组织学基础的研究，得出胚胎免疫组于18胚龄时，法氏囊淋巴滤泡形成界限分明的皮质和髓质[32]，这些说明只有在深入了解免疫器官组织结构的情况下，才能寻找到适当的免疫途径和免疫时间，有效的预防各类疾病的发生。因此，研究正常法氏囊组织结构发育，对禽类疾病的防治有十分重要的意义。 2.材料与方法 2.1.1 材料 2.1.1.实验动物 海兰白种蛋200枚，购自长春净月潭旅游开发区银河养殖场。 2.1.1.2 主要仪器 依爱EIF/C.DME3456孵化机/出雏机，LEICA CM1850冰冻切片机，Olympus CX41显微镜，Pixera pro150ES图像采集器。 美国Media Cybernetics公司image-pro图像分析软件 2.1.1.3 主要试剂 冰冻切片用包埋液OCT(美国Sakura公司)；粘片剂APES(迈新生物公司)；丙酮，二甲苯，95%、100%(北京化工厂)；苏木精，伊红(国医药上海化学试剂公司) 2.1.2 方法 2.1.2.1 实验材料的采取 将200枚实验用海兰白鸡种蛋于本实验室孵化器内，用甲醛-高锰酸钾进行熏蒸消毒，在38.3℃，70%相对湿度，转蛋角度为90度/2h的条件下孵化。孵化期间分别于胚胎11、13、15、18、20天及出壳后1、7、14、21、35天，随机选取5只鸡胚或雏鸡，分离新鲜的法氏囊组织，制备冰冻切片，片厚5μm，供HE染色。 2.1.2.2 冰冻切片HE染色法 取上述制备好的冰冻切片，向切片组织上滴加0.5%火棉胶1-2滴，自然干燥约3min；10%甲醛溶液固定30s；蒸馏水水洗(水洗两次，每次2min )；苏木素染色10min；自来水蓝化；1%盐酸酒精分化30s；自来水返蓝；复染伊红1min；85%酒精10s；95%酒精10s；乙醚-酒精1min， 脱去火棉胶；100%酒精(两次，每次30s)；二甲苯(两次，每次30s)；中性树脂封固，照相。 2.2.1 法氏囊组织结构的动态变化 胚胎13日龄时法氏囊囊腔逐渐隆起形成细长的粘膜皱褶个别区域的粘膜上皮局部出现增