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2015-09-15 发布于重庆
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RNAsin RNA 酶抑制剂使用说明书包装量：目录编号包装单位组成 P 113501 RNase Inhibitor 25μl 113501 1000 U  产品储存：－20 ℃保存，避免起泡，避免剧烈振荡或搅拌。  产品介绍：本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白，与 RNase A 形成 1：1 复合体，对 RNase 表现高度的非竞争性抑制（Ki=3 ×10-10 M ）。该反应是可逆的，通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体，使 RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂（核酸类、无机磷酸类）不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。  活性定义：抑制 5 ng RNase A 活性的 50%所需要的酶量定义为 1 个活性单位（U ）。第一链cDNA合成( 以20 μl反应体系为例) 1.加入 Components Volume Total RNA/mRNA 50 ng-5 μg/5-500 ng Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or 1 μl Random Primer(0.1 μg/μl) or 1 μl GSP(Gene Specific Primer) 2 pmol dNTP Mixture (10 mM each) 1 μl 5× RT Buffer 4 μl RNase Inhibitor(40 units/μl) 0.5-1 μl TUREscript Hˉ RTase 1 μl RNase free H O to final volume 20 μl 2 2. 轻轻混匀如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42 ℃孵育50min 。如用Random Primer ，25 ℃孵育10 min，42 ℃孵育50 min 。 3.70℃加热5 min失活TUREscript Hˉ RTase 。 RT-PCR 反转录所得的 cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20 °C 。