134.紫外分光光度法检验操作规程.docVIP

赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 紫外分光光度法检验操作规程 编 码 SOP-ZL-00-134 页 数 3—1 实施日期 制 订 人 审核 人 批准人 制订日期 审核日期 批准日期 制订部门 质管部 分发部门 质管部 目 的：建立健全紫外分光光度法操作规程，使操作规程规范化。 适用范围：适用于本公司检品紫外分光光度法的检测。 责 任：质管部、QC人员。 内 容： 1、引用标准： 《中华人民共和国兽药典》（二○○五年版一、二部）。 2、仪器的校正和检查： 由于环境因素对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。常用汞灯中的较强谱线237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm、576.96nm,或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正，因钬玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm与637.5nm波长处有尖锐吸收峰，也可作波长校正用，但因来源不同会有微小的差别，使用时应注意。 波长/nm 235（最小） 257（最大） 313（最小） 350（最大） 吸收系数E 124．5 144．0 48．62 106．6 吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬 酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算吸收系数，并与规定的吸收系数比较，如上表，相对偏差应在±1%以内。杂散光的检查可按下表的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。 3、对溶剂的要求： 测定供试品前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求，即用 赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 紫外分光光度法检验操作规程 编 码 SOP-ZL-00-134 页 数 3—2 1cm石英吸收池盛溶剂，以空气为空白（即空白光路中不置任何物质）测定其吸收度。溶剂和吸收池的吸收度，在220～240nm范围内不得超过0.40，在241～250nm范围内不得超过0.20，在251～300nm范围内不得超过0.10，在300nm以上时不得超过0.05。 试 剂 浓度%（g/ml） 测定用波长nm 透光率% 碘化钠 1.00 220 0.8 亚硝酸钠 5.00 340 0.8 4、操作方法： 4.1.打开稳流稳压电源和主机的电源开关，预热二十分钟。 4.2.根据测试要求，选择合适的波长、光源、比色皿，氘灯的适用波长为200-330mm， 钨灯适用波长为330-1000nm。另根据需要，可将相应的滤光片推入光路以减少杂散光。 4.3.选择与测试波长所对应的光电管，625nm以下选蓝敏管，625nm以上选红敏管。 4.4.拉出放大器光门杆，调节狭缝使读数窗显示必须大于1000（信号值），然后推入放 大器光门杆。 4.5.按[MODE]进入工作状态，拉出放大器光门杆，按[100%]键使读数窗显示为0.000再推入放大器光门杆。 4.6.把测试样品的空白溶液倒入比色皿内置于光路中，拉出放大器光门杆，按[100%T] 键使读数窗显示为0.000，然后推入放大器光门杆，取出比色皿倒入样品溶液置于与参比溶液同一光路位置，拉出放大器光门杆，读数窗上显示值即为该样品的吸光度（A），若要透光率（T）只需按（T）键即可。 4.7.按[打印PRINT]键，即可将数据打印出来。 4.8.将放大器光门杆重新推入。双波长，多波长测定依上法依次测定。 4.9. 仪器使用完毕，取出比色皿清洗干净以备下次使用。分别将主机，稳压稳流电源 的开关置于“关”的位置，在使用记录本上登记。 6、注意事项： 赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 紫外分光光度法检验操作规程 编 码 SOP-ZL-00-134 页 数 3—3 6.1.为确保仪器的稳定工作，在电压波动较大的地方应自备220V交流稳压器，仪器接 地必须良好。 6.2.仪器稳定工作时，红、蓝敏管转换需五至十分钟的稳定时间。 6.3.干燥剂筒内的变色硅胶要保持在有效状态，以免光电放大器部分受潮，影响正常工 作。 6.4.仪器应定期校正波长精度，每经过搬动均需校正。