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病原微生物学第十三章分枝杆菌.ppt
第十三章 分枝杆菌属(Mycobacterium) 要求掌握: 1.结核分枝杆菌 (1)形态和染色 (2)培养特性和抵抗力 (3)免疫特点、结核菌素试验的原理、方法结构及意义 2.麻风杆菌的致病性 特点: 1.是一类细长微弯的杆菌,具有分枝生长现象,故称“分枝杆菌” 2.细胞壁含有大量脂质(分枝菌酸),一般染色不易着色,一旦着色有抵抗盐酸酒精的脱色作用,故又称“抗酸杆菌” 3.不产生毒素及侵袭性酶,致病性与菌体成分有关,引起慢性疾病,并伴有肉芽肿 4.营养要求较高,专性需氧,生长缓慢 结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis) 一、生物学性状 (一)形态染色: G+,菌体细长微弯,具有分枝生长现象,抗酸染色阳性(红色),菌体排列分散,无鞭毛,无芽胞(如图) 齐尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法: 初染:浓石炭酸复红 5-7min 加热 脱色:3%盐酸酒精 1min 水冲 复染:美蓝 (亚钾蓝/次甲基蓝) 1min 水冲 干后镜检 抗酸菌为红色 非抗酸菌为蓝色 加热目的:使菌体表面疏松,以便染料的渗入;增强染液在脂质中的溶解度 具有抗酸性的机制: (1)具有分枝菌酸,能与复红结合成牢固的复合物 (2)细胞结构完整 (3)石炭酸在脂质中的溶解度大 (二)培养特性 1.专性需氧,营养要求较高,常用罗氏培养基 罗氏培养基的成分:甘油、马铃薯、鸡蛋、无机盐、孔雀绿(如图) 2.在液体培养基中常出现菌膜生长,并有皱纹 3.生长缓慢,菌落呈菜花、颗粒或结节状(如图) (三)抵抗力 1.耐干燥,在干燥痰、飞沫中能存活半年 2.对湿热敏感,生活用品、痰常用煮沸消毒 3.对紫外线敏感,常用于病房空气、床上用品消毒 4.对75%乙醇敏感,常用于医务人员手等消毒 5.对链霉素、异烟肼、利福平等敏感,用于治疗 (四)变异性 TB基因组为4.4Mbp,含有4000个基因,部分基因呈高度可变性 1.毒力变异: 卡介苗(BCG)——卡-介二氏将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于含胆汁、甘油、马铃薯的培养基中,经230次传代,历时13年,获得的毒力减弱,保留免疫原性的疫苗株。 2.抗原性变异: 3.耐药性变异: 对异烟肼、链霉素、利福平等抗生素易产生耐药性,甚至出现多重耐药株 4.L-型变异: 抗酸性减弱,染色不能发现 常规培养不能生长 与结核的恶化、复发、耐药有关 二、致病性 (一)致病物质 1.荚膜: 近年发现结核杆菌有荚膜 主要成分为多糖,部分为脂质和蛋白质 功能: (1)能与吞噬细胞表面的CR3结合,利于细菌的黏附和侵入 (2)荚膜中有多种酶,可降解宿主的大分子物质而作为其营养 (3)能防止有害物质进入,如:小分子的NaOH,故用其消化痰液时不被杀死 (4)能抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的融合,抗吞噬作用 2.脂质:含量越高,致病性越强 (1)磷脂:促使单核细胞增生,使病灶中巨噬细胞转变为上皮细胞而形成结核结节 (2)分枝菌酸:与抗酸性有关,能减弱溶菌酶、抗体的杀伤性 索状因子:破坏细胞线粒体和氧化磷酸化,抑制白细胞游走,形成慢性肉芽肿 (3)蜡质D:有佐剂作用,可刺激机体产生迟发型超敏反应 (4)硫酸脑苷脂:抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体融合,使该菌长期存活于细胞内 3.蛋白质:有抗原性,结核菌素与蜡质D结合引起超敏反应,引起组织坏死和全身中毒症状,抗体无保护性 4.多糖:使中性粒细胞增多,局部病灶细胞清润 5.核酸:核糖体核糖核酸刺激机体细胞免疫 (二)所致疾病: 结核病(痨病、慢性消耗性疾病、富贵病)(如图) 1.传染方式:以呼吸道为主的多途径 2.易感人群:易感率高,发病率低 3.值得注意:近20年来,结核开始死灰复燃,出现第三次回升 2000年全国结核病流调第一次对全人口感染率进行了调查,结果显示全国人口感染率为44.5%,明显高于全球1/3人群感染的水平。据此推算,我国约有5.5亿人感染了结核菌。 ?1.我国80%的肺结核病人在农村,大部分病人为青壮年。 ?2.结核病死亡居各种死因顺位的第9位。 ?3.结核病死亡中以肺结核为主,占90.2%。 ?4.结核病死亡平均年龄为55.2岁,每年死亡13万人。 ?5.在全球22个结核病高负担国家中我国发病人数位列第二,仅次于印度。 4.结核病 (1)肺部感染 ①原发感染:原发综合征(原发灶、肺门淋巴结肿大、结核结节)(如图)
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