第七章BoneTissueEngineering.ppt

主要内容 软骨组织的组成及发生 骨组织的组成及发生 种子细胞 支架材料 生长因子 组织工程骨的构建 软骨的组成 骨的组成 骨组织 骨膜 骨髓 骨祖细胞 (osteoprogenitor cell) —— 位于骨膜深层 2. 成骨细胞 (osteoblast) —— 表面，来源于骨祖细胞 骨细胞 (osteocyte) —— 位于骨陷窝、 骨小管内 来源于成骨细胞 骨膜的组成 骨外膜 外层 致密，含粗大胶原纤维束 内层 疏松，含血管、骨祖细胞 骨内膜 薄层结缔组织＋1 层扁平的骨祖细胞 骨的发生 来源：间充质 两种方式 膜内成骨 (intramembranous ossification) 软骨内成骨 (endochondral ossification) 骨组织的发生过程基本一致 骨的改建 (remodeling) 持续终生 种子细胞 骨的生成是由成骨细胞向周围分泌基质和纤维，将自身包埋于其中，形成类骨质，有钙盐沉积后变成骨组织而完成的。 因此成骨细胞是骨组织工程的种子细胞。 目前种子细胞的来源主要有骨外膜、骨髓、骨、骨外组织。 种子细胞的来源之一 骨外膜 骨外膜中含有骨原细胞、成纤维细胞、成骨细胞和破骨细胞。骨原细胞保持着分化潜能，可被激活增殖分化为成骨细胞。取骨外膜培养可分离出成骨细胞。 优点：具有很强的繁殖和分化为成骨细胞的 能力，易存活。 缺点：供区组织的损伤。 骨 胚胎与新生动物骨及人胚胎骨经培养得到成纤维细胞样细胞，适当条件可进一步分化为成骨细胞。 优点：易定向分化为成骨细胞。 缺点：供区损伤及来源的局限性。 骨外组织 起源于胚胎时期间充质的骨外部位的骨祖细胞，在诱导因子的持续作用下可维持其成骨的功能。如周皮细胞、C212成肌细胞、成纤维细胞等。家兔皮肤的成纤维细胞在体外培养，不仅能产生粘多糖和胶原等基质成分，还有钙盐沉积，有新生骨组织形成，证明皮肤成纤维细胞在体外有成骨的潜能。 优点：取材容易、创伤小，传代繁殖快。 缺点：适应受区环境的能力较差。 支架材料 需具有以下特点： ①良好的生物相容性、生物可降解性； ②良好的骨诱导性和骨传导性； ③具有负荷最大量细胞的高渗透性； ④支持骨细胞生长和功能分化的表面化学性质与微结构； ⑤可与其它活性分子如骨形态发生蛋白（BMP）、转移生长因子-β（TGF-β）复合共同诱导骨的发生； ⑥易消毒性。 支架材料 人工合成聚合物 ——聚乳酸（PLA）和聚羟基乙酸（PGA） ——聚乳酸与聚羟基乙酸共聚物（PLGA） ——多聚羟基酸、聚酣、聚亚胺、聚偶磷氮、胶原 ——具生物活性的玻璃陶瓷（BGC）、羟基磷灰石（HA） 钙磷陶瓷即羟基磷灰石和磷酸三钙（HA/TCP） 支架材料 　珊瑚是一种海生无脊椎动物的骨骼，其化学成分99%为碳酸钙，还有少量其它元素和有机成分，类似无机骨。采用经特殊理化处理的珊瑚人工骨，其微孔道结构有利于骨组织长入和替代，是一种良好的骨替代品。但珊瑚人工骨质地脆，吸收快，植入后有一定体积丧失，而限制了它的使用。 支架材料 金属、胶原、明胶、脂质体等也有应用报道。 人工合成的聚合物对人体来说仍是异物。植入体内，可引起不同程度的炎性反应，也存在免疫原性问题，致癌性问题。 支架材料 天然无机骨 采用动物骨，经物理、化学及高温处理，除去其有机成分，保留无机成分的三维结构外型。其主要成分为羟基磷灰石，具有新生骨出现早、生长快、成骨量多的特点。 支架材料 生物性和非生物性材料复合，如HA、BGC、无机骨、胶原等均可与BMP或生长因子（GF）复合修复骨缺损，其具有良好的骨传导与骨诱导双重作用，成骨作用显著大于单纯材料组。 目前有学者提出理想的骨移植材料应是适宜的支架的材料、BMP、GF的复合，并取得了初步的成功。 生长因子 常用的生长因子有： 成纤维细胞生长因子（FGF） 转化生长因子-β（TGF-β） 胰岛素样生长因子（IGF） 血小板衍化生长因子（PDGF） 骨形态发生蛋白（BMP）等。 生长因子 它们不仅可单独作用，相互之间也存在着密切的关系，可复合使用。 生长因子通过调节细胞增殖、分化过程并改变细胞产物的合成而作用于成骨过程 。 骨组织构建 构建组织工程骨的方式有几种： 支架材料与成骨细胞； 支架材料与生长因子； 支架材料与成骨细胞加生长因子。 * BONE TISSUE ENGINEERING 软骨膜 软骨基质 软骨