组织细胞基因组DNA提取试剂盒.pdfVIP

◆ 组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 ◆ 目录号 1408 ◆ 使用手册 ◆ 实验室使用，仅用于体外 组织/细胞基因组DNA 提取试剂盒 目录号：1408 目录编号 包装单位 140801 50次 140802 100次 140803 200次  适用范围： 适用于快速提取各种动植物细胞/组织基因组DNA  试剂盒组成、储存、稳定性： 试剂盒组成 保存 50 次 100 次 200 次 细胞核裂解液 室温 30 ml 60 ml 120 ml 蛋白沉淀液 室温 10 ml 20 ml 40 ml DNA 溶解液 室温 10 ml 15ml 30 ml RNase A(10mg/ml) -20℃ 100 μl 200 μl 400 μl 本试剂盒在室温储存12 个月不影响使用效果。 - 1 - 储存事项: 1. 环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在 37℃水浴加热几分钟，轻轻旋摇，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量 的泡沫。 2. 蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不 能完全溶解，也不影响使用效果，直接取用上层溶液即可。 3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时 盖紧盖子。  产品介绍： 本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组 DNA 。样品研磨或者匀浆 后加入细胞核裂解液，首先在强去污剂或者和蛋白酶K 协同作用下裂解细胞释放出基 因组DNA ，接着加入RNase A 去除RNA ，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最 后纯净的基因组DNA 通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA 溶解液。  产品特点： 1. 不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。 2. 快速，简捷，组织样品操作整个过程可在1 个小时内完成。 3. 结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280 典型的比值 达 1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR ，Southern-blot 和各种酶切 反应以及文库构建。  注意事项： 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机， 如Eppendorf 54 15C 或者类似离心机。 - 2 - 2. 用户需自备异丙醇、70 ％乙醇、PBS(用于细胞) 、液氮研钵/或匀浆器(用于组织）、 0.5M EDTA和蛋白酶K(用于鼠尾) 、水浴箱。 3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。 4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞 量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。  操作步骤： （实验前请先阅读注意事项） 1. 组织培养细胞 a. 收集细胞到一个 1.5ml 离心管；对于贴壁细胞，应该先用胰蛋白酶消化后吹 打下来收集。 b. 13,000rpm 离心10 秒，使细胞沉淀下来，弃上清，留下细胞团和大约10-50μl 残留的液体。 c. 加200μl PBS 重悬洗涤细胞，重复上一步骤，高速涡旋振荡重悬细胞团。 d. 对于细胞核裂解液裂解效果不好的细胞系（例如PC12 细胞），在做下一步骤 前，应该做几次冻融循环：冻