T迷宫实验方法.docVIP

T迷宫 T迷宫是广泛用于研究空间学习，交替行为，条件识别学习和工作记忆的器具。根据它的模块化设计，我们的T迷宫系统能够以不同的配置运行。 T迷宫 限制动物饮食,直至体重降低到最初体重的85%; 适应迷宫阶段:目的是让小鼠熟悉迷宫并学会跑到左或右臂尽头来获得食物,每只小鼠要在迷宫中呆20-30分钟. 测验阶段:每只小鼠要进行10回测验,每回包括两次,强制次和选择次。强制次方向左右各5次，但随机安排。具体过程是：首先进行强制次，按照事先随机安排好的方向，如果是右，则将隔板放在左侧，阻止小鼠进入左臂。当小鼠进入指定的目标臂后，在目标臂尽头放1小粒食物，待小鼠吃完食物后，将其放回笼内。 30秒后开始选择次实验。移开隔板，小鼠被放在出发臂，观察小鼠所选择的目标臂。如果小鼠的选择方向与强制次的方向相同，则是”得到-停留“策略；反之，则是“得到-转移”策略。 记录每只动物的测试结果，两种策略的选择次数，然后综合所有动物的结果进行统计分析。 近半个世纪前，Kivy和Dember等人证明大鼠能辨别T-形迷宫（T-maze）两臂颜色的变化。他们发现，将雄性大鼠置于T-形迷宫的主干臂15~30min，让其能看见、但不能进入黑白两臂。然后，改变其中一个臂的颜色，使两臂同为黑色或白色。让大鼠自由选择T-形臂。结果显示，大鼠总是选择改变了颜色的那个臂（新异臂）。这一过程要依靠动物的记忆来完成。由此发展而成的T-形迷宫实验成为目前用于评价空间记忆的最常用的动物模型之一。当然，现在的T-形迷宫使用的是食物而不是臂的颜色作为动物探究的动力。通常用这一模型来研究动物的空间工作记忆（spatialworking memory），即测定动物只在当前操作期间有用的信息。经改进后的T-形迷宫也可用来评价参考记忆（referencememory），即记录在这一实验中任何一天、任何一次的测试都有用的信息。 （一）实验设备?? ??????这里介绍上海欣软信息科技游戏公司生产的T迷宫。迷宫由两个长46cm、宽10cm、高10cm的目标臂（goalarms）和一个与之垂直的长71cm、同样宽度和高度的主干臂（stem）或起始臂（approachalley）组成。主干臂内置一个16cm*16cm的起始箱，并有一闸门与主干臂的另一部分相联。实验用雄性成年大鼠。饮水不限，但进食控制在每天16~20g，以使体重保持在非进食大鼠体重的85%。在整个训练和测试期间，大鼠体重每周增加不超过5g。 （二） 实验方法? ???????这里介绍传统T-形迷宫实验和T-形迷宫自主交替实验。 ?? 1.传统T-形迷宫实验 （1）适应? 在T-形迷宫臂内分撒6粒食丸（45g），让大鼠适应迷宫5min，每天一次，连续5天。 （2）强迫选择训练??将大鼠放入主干臂的起始箱，打开闸门，让大鼠进入迷宫的主干臂。随机、交替选择左右两臂之一放入4粒食丸，同时关闭另一臂，使动物被迫选择食物强化臂并完成摄食；每天6次，连续4天。 （3）延迟位置匹配（delayed matching-to-position,DMP）训练 1）将动物放入闸门关闭的起始箱，打开闸门，让动物进入主干臂。 2）关闭一侧目标臂，强迫动物进入另一侧开放臂以获得2粒食丸奖赏。 3）立即（最短延迟，少于5s）将动物放回主干臂，开始匹配训练中的第二次训练；此时两个目标臂均开放。动物将两前肢和至少两后肢的一部分置于一个目标臂时完成“一次选择”。动物返回到强迫选择训练时进入过的臂则获得食物奖赏（4粒食丸），记录一次正确选择；若动物进入另一臂，则没有食物奖赏，并且将其限制在该臂内10秒，记录一次错误选择。 4）一次匹配训练结束后将动物放回笼内5~10min（与此同时训练其他动物），再重复下一次匹配训练。每天8次。 动物连续两天的正确选择次数达到15/16，则认为达到标准，可以开始实验。如动物经过30天训练仍然达不到标准，则予以淘汰。 5）动物训练达标后一天，给予一次匹配训练。所不同的是，强迫选择训练后，将T-形迷宫旋转180度，再进行上述开放臂的训练。这样做的目的是评价动物是否为定位性操作（有赖于迷宫外信号）或反应性操作（不依赖迷宫外信号）。 6）接着两天，每天给予10次匹配训练，每次训练间隔为60s，用以评价动物的工作记忆操作。记录进入食物强化臂的次数和再次进入非强化臂的次数。后者被认为是工作记忆错误。正常健康年轻的大鼠几乎每次均能准确操作。当操作稳定、且选择准确率高（工作记忆错误少于10%）时，可进行药物测试或脑区毁损后的操作实验。 ? 2．T-形迷宫自主交替实验（spontaneous altemation on a T-maze）?1925年，Tolman首次报道了一个有趣的发现：在迷宫实验中，大鼠极少重复进入迷宫的同一臂