不同载体蛋白偶联制备促红细胞生成素二聚体单克隆抗体的选择优化.pdfVIP

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2015-09-20 发布于湖北
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不同载体蛋白偶联制备促红细胞生成素二聚体单克隆抗体的选择优化.pdf

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不同载体蛋白偶联制备促红细胞生成素二聚体单克隆抗体的选择优化.pdf

论著基础研究中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷不同载体蛋白偶联制备促红细胞生成素二聚体单克隆抗体的选择优化邱贞琴1，邰秀珍2 SClum 目的 dimer分别连接牛血清蛋白(bovinealumin，BSA)、匙孔血蓝蛋白(keyholelimpet [摘要] 将EPO hemocyanin，抗EPOdimer单克隆抗体。方法采用单克隆抗体制备技术筛选获得杂交瘤细胞；ELISA法鉴定杂交瘤细胞的特性；分析比较不同 dimer抗体。经过进载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果。结果共筛选获得了5株杂交瘤细胞，5株杂交瘤细胞均能分泌EPO 一步的特异性鉴定、亚型鉴定以及效价鉴定后，有4株杂交瘤细胞被挑选进行大量抗体制备，为后期临床基础实验提供材料。4株杂 IgG2b，K；其中克隆S-18-2、S-514-7分泌抗体EPO 应只针对EPOdimer；克隆S-369-7、S-410-3分泌抗体EPO 原抗体反应可以同时针对EPOdimer以及EPOdimer—PEG，即本实验获得的这2株杂交瘤细胞分泌的抗体既可检测EPOdimer又可检测EPOdimer—PEG。比较连接BSA、OVA、KLH这几个不同载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果，发现以EPOdimer连接载体蛋白 OVA获得的单克隆抗体效果最佳。结论本实验用偶联载体的方法增强了小分子EPOdimer的免疫原性，得到了稳定分泌EPO dimer抗体的杂交瘤细胞。 [关键词]促红细胞生成素；单克隆抗体；酶联免疫吸附测定；杂交瘤技术 [中图分类号]R446．61[文献标识码]A [文章编号]1005—1678(2014)08—0088—04 ofmonoclonalantibodiesEPOdimer by Preparation hybridoma techni withWiUldilterentdifferentcarrler euqmalcetcoupnngr．piingeirrac Xiu—zhen2 QIUZhen．qinl，TAI of for Hberationof of (1．DepartmentSystemCenter，PeoplesArmyEighty-ninthHospital，Weifang Clinical Medical 0101 Medicine，Inner Mongolia University，Huhehaote10，China) To EPo withseveraldifferentcarrier connectdimer BALB／e