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核酸熔解温度的研究进展与寡核苷酸设计平台的研制.pdf
《生命的化学》!# 年!# 卷! 期 ·156 ·
!技术与方法
$%’()*+, -. /(. !# ,!# (! )
0 0 文章编号:121334 (!# )!2 156 2#
核酸熔解温度的研究进展与寡核苷酸设计平台的研制
王0 非0 杨0 欣0 郑0 珩0 789: ,; /=:?@A1
1
(中国药科大学生物制药学院,南京!1B ;!#$%’( )*+ ,,’-./0.1 ,234’ #3!1! )
摘要:核酸熔解温度的预测在C$+ 等分子生物学实验中具有重要意义,近年来出现了一些基于最邻近热力学的计
算方法,并不断得到优化。介绍两个重要的算法,并应用于寡核苷酸设计平台的研制中。基于较新的5 值算法,
@
提出了一套简并核酸热力学参数,以满足简并寡核苷酸设计的要求。
关键词:熔解温度;寡核苷酸;生物信息学
中图分类号:
D5!! 、D41
! 早期的!# 值算法 近热力学(9:?:XK29:HM=L KM:@LYA9?@RX )为基础
在分子生物学实验如C$+ 、)L8KM:9 印迹等操 的5 值算法。NOP 的解链温度直接取决于双链之
@
作中我们经常需要估算核酸的熔解温度( 间的结合能量,若要精确计算 5 值,则需精确求解
5 ),从而
@ @
使反应在最适条件下进行。5 值的精确预测对于 [# ]
@ 双链之间的结合能量。ZL: 等 率先将最邻近理
研究NOP 的复制、突变、修补和转录也具有重要的 论引入到NOP 双链稳定性问题上。此后Z:XF?8:
意义[1]。对5 值的预测也有多种方法。在早期, [5 ]
@ 等 对此进行了更为深入的研究,通过一系列人工
经常被使用的是被称为“Q?FF?R: 法则”的估算公 合成的寡核苷酸为模型测算出一定温度下各碱基之
[! ]
式 : 间的熵变() )与焓变(% ),从而通过公式 T S
! ! !
5 S # (T U $ )U ! (P U * ) [式1] % W * V ) 推导出各碱基间的自由能变(T
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