丝状真菌AL18的原生质体制备和再生条件的优化.pdf

renneHimmelszeltinvolvedinthebiosynthesisofdiphyllin[J].Phyto @@[16]李臻，景震强，夏春谷.金属卟啉配金物的催化氧化应用研究进 chemistry,2007,68(22-24):2736. 展[J].有机化学,2007，(1)：34. @@[15]阳葵，李晓静，冯霞，等.底物的分散和溶解对甾体微生物酶反应 @@[17]梁建军，汪文俊.微生物生物转化甾体化合物生产雄烯二酮研究 的影响[J].微生物学通报，2001，(6)：68. 进展[J].湖北农业科学，2012，(7)：1309. 丝状真菌AL18的原生质体制备和再生条件的优化 卢明锋张月杰 山东理工大学生命科学学院，山东淄博255091 摘要：目的：为了建立起产苝醌类光敏剂丝状真菌AL18原生质体制备和再生体系。方法：采用单因素实验法研究了预处理 方式、渗透压稳定剂和酶解条件对原生质体制备率和再生率的影响。结果：原生质体制备及再生的最佳条件是用0.3％的β-巯 基乙醇预处理15min，酶解液以0.6mol/L的MgSO4·7H2O作为渗透压稳定剂,0.02mol/L的磷酸盐缓冲液pH值为5.8，纤维 素酶 ∶蜗牛酶=2∶3，酶的总浓度为15mg/mL，36℃酶解2h;以0.6mol/L的蔗糖作为再生培养基的渗透压稳定剂。结论：原生质体 的制备率和再生率可分别达到1.42× 107/mL和3.2％。 关键词：苝醌类；光敏剂；原生质体；制备；再生 Q932 A 10.3969/j.issn.1004-311X.2012.03.75 OptimizationofPreparationandRegenerationCondition ofProtoplastfromFilamentousFungiAL18 LUMing-feng ZHANGYue-jie 2011-11-14 2012-02-09 基金项目：国家重点基础研究计划项目（“绿色化学农药先导结构及作 用靶标的发现与研究”，2003CB114400）；云南省自然科学基金项目 （“新型光敏抗肿瘤药物先导结构的发现”，2005C00078M）资助 作者简介：卢明锋 （1975-），男，山东省阳谷县人，在读博士生，讲师， 研究方向：微生物发酵、应用分子生物学，发表论文12篇，Tel:+86- 533-2781763,Email:lumingfeng4659@。 万方数据 ’…．…．。07f’ -结构复杂，选择合适的酶系统对原生质 万方数据 ’……LO二]，qj__‘土 ·戳^巨E，峄，叶皿￡）0，H，卅、工￡二H i40℃时的7.1×106/mL,这可能是由于细 万方数据 认为嚣嚣大的西丝多从佣咖释放原生 万方数据 @@[7]彭莹莹，葛海燕.光动力抗菌化学疗法治疗难治性细菌感染性疾 病的研究进展[J].中国激光医学杂志，2010，19(1):50-53. @@[8]熊鸿雁，陈惠孙，胡小兵，等.特异光敏作用对血细胞悬液中DH- BV的灭活作用[J].中