基因修饰BMSCs抑制增生性瘢痕的实验研究.pdfVIP

212 Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery, February 2008, Vol. 22, No.2 · · 基因修饰BMSCs 抑制增生性瘢痕的实验研究 1 2 3 4 4 邱林 金先庆 Paul A Kingston 罗小辑 丁幸坡 【摘 要】 目的 通过将转染TGF-β 基因的兔BMSCs 移植于兔耳瘢痕模型，观察转基因BMSCs 对创面愈合 3c2s2 后增生性瘢痕形成的影响。 方法 成年健康日本大耳白兔20 只，体重1.7 ～2.5 kg ，雌雄不拘。取第3 代兔BMSCs ，经 5 Ad-TGF-β 在感染复数 150 下转染，培养孵育24 h 后，调整细胞浓度为1×10 /mL 备用。将纯化、浓缩的Ad-TGF-β 3c2s2 3c2s2 8 颗粒，DMEM/F12 （不含FBS ）稀释为1×10 pfu/mL 备用。于20 只日本大耳白兔双侧兔耳分别制备两个2 cm × 2 cm 大 小的腹侧全层皮肤、软骨缺损创面。将每只兔的4 个创面随机分为空白对照组（A 组）、Ad-TGF-β 组（B 组）、BMSCs 组（C 3c2s2 组）和BMSCs/Ad-TGF-β 组（D 组），并以自身正常皮肤作为正常对照（E 组）。将备好的细胞及病毒液分别按创面分 3c2s2 组进行局部移植。于术后21 、45 、90 d 行大体观察、瘢痕硬度和厚度测定、HE 染色和免疫组织化学检测。 结果 大体 观察：A 、B 、C 组上皮化后创面均逐渐形成不同程度的瘢痕，伤后45 d 瘢痕增生程度达高峰，明显高出皮肤表面，持续至 90 d，D 组在观察期内均无明显高出周围皮肤的瘢痕形成。术后45 d 和90 d，A 、B 、C 组瘢痕厚度和硬度明显高于D 组， 且差异均有统计学意义（P 0.01 ），而B 组低于A 、C 组，差异有统计学意义（P 0.01 ）；D 组愈合后创面厚度和硬度与正 常皮肤接近。HE 染色观察：A 、C 组伤后45 d 可见浅层组织结构排列紊乱，胶原纤维粗大，呈交错网织状排列；B 组和D 组结构与正常皮肤接近，但较E 组胶原排列致密，表皮较A 、C 组薄；90 d 各组结构与45 d 相似。BrdU 免疫组织化学观 察，伤后21 、45 d ，C、D 组均能见到散在分布、胞核染色阳性的棕色细胞，A 、B 、E 组均为阴性。 结论 创面局部移植人 TGF- β 基因修饰的BMSCs ，具有抑制创面愈合后增生性瘢痕的作用。 3c2s2 【关键词】    TGF-β 基因 BMSCs 细胞移植 增生性瘢痕 创面愈合 兔