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植物细胞工程的基本技术(叶伟健)

专题2 细胞工程 2.1.1 植物细胞工程的基本技术 桂平市第一中学 叶伟健 1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆动物-----克隆羊多利诞生于英国, 标志着一种新的生物技术---动物体细胞克隆技术面世, 也揭开细胞工程更深层次发展的序幕! 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 理解概念: 概念:课本31页 根据操作对象的不同,分为植物细胞工程和动物细胞工程 前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术。 克隆多莉羊技术是 水平上的技术,培育抗虫棉是 水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比: 细胞 分子 思考: 细胞的全能性 1、定义: 具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能 2、原理: 生物体的每一个细胞都包含有该物种的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因. ?受精卵 生殖细胞 体细胞 > 3、大小: ?植物细胞>动物细胞 >胚胎干细胞> 注意:受精卵的全能性最高 在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性地表达出各种蛋白质,从而构成生物体的不同组织和器官 4、在生物的生长发育过程中,体内细胞并没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织器官的原因 5、植物细胞表现出全能性的条件: ?离体?一定的营养物质、激素 ?适宜的温度、pH、无菌等外界条件 实验:胡萝卜的组织培养 获取 外植体 无菌接种 诱导愈伤组织 的形成 试管苗的形成 扩大培养 移栽 脱分化 再分化 (1)在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 合作学习 植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分,有利于培养物 的生长,然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长,所以植物组织 培养过程中污染现象经常发生。培养基一旦被污染,迅速生长的各 种杂菌不但会和培养物争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中会生 成大量对培养物有害的物质,导致培养物迅速死亡。造成培养基污 染的因素有很多,一般包括:外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌 不彻底、操作人员操作不规范等。所以在组织培养实验中用到的植 物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌,实验人员操作一定要规范, 避免带入杂菌。 (2)在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下,胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株,你能用实验的方法进行验证吗? 胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花)也能培养再生形成小植株,只是诱导愈伤组织比较困难。 (3)请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。 植物材料 (消毒) 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田培 养成正常植株 合作学习 1、植物组织培养的大致过程包括哪几个阶段? 离体的器官、组织或细胞 脱分化 (又叫去分化) 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 2、植物组织培养技术的理论基础是什么? 植物细胞具有全能性 用关键词、箭头表示过程 应该掌握的几个概念: 1愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种a高度液泡化、b无定形状态薄壁细胞组成的c排列疏松无规则的组织。 2、植物细胞的脱分化: 由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。 脱分化的实质和结果分别是什么? 实质是恢复细胞的全能性过程。 结果是形成愈伤组织。 3、植物细胞的再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 小结: 植物组织培养的过程 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 (离体的,已分化组织或细胞) (未分化) (分化) 条件? 优点? 特点? 繁殖速度快不受季节限制工厂化生产幼苗无毒保持优良性状 ①适宜温度、 pH和无菌环境。②无机物、有机物和植物激素(生长素,细胞分裂素等) 无定形状态薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则无叶绿体,不进行光合作用 植物组织培养的概念: 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 再见

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