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小麦苗枯病菌的ITS分析及PCR检测
植物病理学报
( ) ( )
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA 33 3 :198202 2003
小麦苗枯病菌的 ITS 分析及 PCR 检测
葛芸英 , 郭坚华
(南京农业大学植物保护学院植物病理系 , 南京 210095)
( ) (
摘要 : 小麦苗枯病菌 Clavibacterf angii ,Cf 是引起小麦细菌性苗枯病的病原 ,本研究用 16S～23S rDNA 间的内源转录间隔区 inter
’ ’ ’ ’
) ( ) ( )
nally transcribed spacer , ITS 序列通用引物 L 1 5AGTCGTAACAAGGTAGCCGT3 和 L2 5GTGCCAAGGCATCCACC3 扩增 Cf 和其它
相关细菌的基因组 DNA ;并对其 PCR 产物进行回收 、克隆和测序 ,将所获序列和其它已报道的细菌 ITS 序列进行多重比较后设计
’ ’ ’ ’
( ) 和 I2 (5 ) 。此引物可以从 Cf 中扩增出351
出 Cf 的特异性引物 I1 5TGCCAAGTCACACTGAGACGA3 CAATGATCTACCACCCTCCGA3
bp 的特异性片段 ,而其余参试的21 个细菌 PCR 反应结果均为阴性 。该方法可以应用于小麦苗枯病菌的快速 、可靠检测 。此外 ,
本研究对多种植物病原棒形杆菌的 ITS 序列进行比较研究 ,发现其具有一定的分类意义 。
关键词 : 小麦苗枯病菌 ; ITS 分析 ; 分类 ; 检测
Analysis of ITS sequence and PCR protocol for the detection of Clavibacter f angii , the causal agent
(
of wheat seedling wilting disease GE Yunying , GUO Jianhua Department of Plant Pathology , College of Plant Protection , Nan
j ing Agricultural University , Nanj ing 210095 , China)
Abstract : A polymerase chain reaction ( PCR) protocol was developed to specifically detect Clavibacter f angii ( Cf) , the
causal agent of w
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