核盘菌致病力衰退相关真菌病毒（SsDRV）全长cDNA克隆与侵染性cDNA转化载体的构建.pdfVIP

核盘菌致病力衰退相关真菌病毒(SsDRV)全长eDNA克隆及侵染性eDNA转化载体的构建 摘要 真菌病毒普遍存在于各类真菌中，因其很少使寄主出现异常表型而难以引起人 们的关注。植物病原真菌内存在一些可导致病原寄主出现病毒性致病力衰退的真菌 病毒，并被成功应用于植物病害的生物防治，但病原寄主种内复杂的营养体不亲和性 限制了病毒的传播扩散，随之影响到致病力衰退相关病毒的控病效果和应用范围。 核盘菌是一种重要的植物病原真菌，由核盘菌引起的菌核病是世界性分布的重要病 害。菌核病因缺乏野生抗性资源、自然寄主广泛、病原菌自身抗药性等原因，在防 治上一直存在极大的困难。本论文以分离自佳木斯发病茄子植株上的核盘菌弱毒菌 以下一些研究，尝试将其应用于菌核病的生物防治： 登录注册(登录号为AYl47260)。 序列分析表明，SsDRV只有一个开放式阅读框(nt93-5195)，推定的氨基酸序 列包含许多正链RNA病毒复制酶系中典型的甲基转移酶、解螺旋酶和依赖RNA的 cinerea) 科allexivirus属病毒以及一种未分类的侵染植物病原菌灰葡萄孢(Botrytis 的真菌病毒肋trytis 运动蛋白而有别于alle]【ivirus属植物病毒和BVF。 在SsDRV序列中部确定一个单一酶切位点c缸I(nt2338)，从位点的上游和下 增3’端和5’端包含ClaI酶切位点的片段，分别连接至UpMDl8碱体上获得亚克隆。选 克隆。 35S启动子，获得用于转 pCAMBIAl301中原有的用于启动潮霉素抗性基因的CaMV 化丝状真菌的SsDRV全长侵染性cDNA转化载体。 将构建好的载体通过热击转化导入农杆菌EHAl05菌株，通过农杆菌介导转化 核盘菌的重寄生真菌盾壳霉。 本研究的目的是尝试一种利用核盘菌致病力衰退相关真菌病毒来控制菌核病的 可能途径，即由核盘菌重寄生真菌盾壳霉的寄生作用来打破核盘菌株系问菌丝亲和 型的阻碍，达到在不同菌丝亲和型核盘菌间传播真菌病毒的目的，以期在开发SsDRY 这一核盘菌潜在的生物防治资源的同时，探索出一种新的真菌病毒控制植物病害可 能途径。 关键词：真菌病毒，弱毒病毒，SsDRV，侵染性cDNA，真菌转化，核盘菌，生物 。 防治 核盘菌致病力衰退相关真菌病毒(SsDRV)全长eDNA克隆及侵染性eDNA转化载体的构建 Abstract is 10 are inallkindsof it difficultdiscoversince Mycovirusubiquitous fungi，but seldomleadstovisible areafew insome myccvirus phenotype．Theremycovirusplant call thatcallmaketheirhosts be hypovirus pathogenicfungi appearhypovirulence．These usedtobiocontrolsome disease the plant successfully,whilevegetativeincompatibility the of differentstrainsof limit obstruct hypovirus