金纳米团簇的合成及在生物传感器中的应用.pdfVIP

密级 学校代码 10542 学号 2Q!lQ2121122 金纳米团簇的合成及其在生物 传感器中的应用 of template--basedgold Preparation l · l ·一 ● l- ·- ■ 7andtheir in nanoclusters …●l aOplication SenS0rS biological 指导教师姓名、职称 睦选塾撞 学 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二零一四年五月 摘要 近年来，亚纳米尺寸的贵金属纳米团簇由于其独特的物理化学性 质在基础科学研究和技术探索领域备受关注。在不同领域里贵金属纳 米团簇的多种应用被相继提及，例如：化学传感、生物成像、催化、 生物标记和电化学等，在众多应用领域里，荧光生物传感器近年来发 展得比较迅速，因其合成简便、操作简单、灵敏性高且能够重复利用。 所以基于贵金属纳米团簇的荧光生物传感器尤为重要。 disease，AD)又称为老年痴呆症，是一 阿兹海默病(Alzheimer’S 种常见的神经退行性疾病，可以严重的影响人的记忆能力和认知能 力。人脑内的乙酰胆碱酯酶具有极高的水解活性，能降解神经递质乙 酰胆碱，被看作治疗阿兹海默病的有效靶标。人脑内乙酰胆碱的含量 与胆碱能功能障碍有密切关系。传统检测方法有诸多限制，例如：灵 敏度低、干扰因素多、前处理复杂等…因此，开发出有效的方法检测 出血液中的胆碱类物质有着十分重要的意义。 本论文合成了一种荧光金纳米团簇作为荧光分子探针，用于高灵 敏高选择的检测胆碱类物质，我们将其运用到人类血清样品中检测血 液中的胆碱类物质也取得了令人满意的结果。 本论文的主要工作如下： 1．研究发现蛋白质中包含氨基、羧基、巯基等官能团，能够作 为有效的配基起结构稳定作用，以其为模板能够合成发荧光的纳米材 料一金纳米团簇。本文将一种蛋白质——牛血清蛋白变性，充分利用 其结构中的35个半胱氨酸残基作为共价配基稳定金属原子。文章分 别考察了蛋白质原料是否变性，环境中离子强度变化和不同存放时间 等因素对金纳米团簇荧光效率的影响，制得的金纳米团簇分散性好， 粒径为1—2nrn，在紫外灯照射下发出强烈的红色荧光。 2．使用上述合成方法，以变性的牛血清蛋白为模板能够合成稳 定的金纳米团簇，基于此我们构建了一种简单无标记的荧光生物传感 器检测生物体内乙酰胆碱酯酶的酶活。由于乙酰胆碱酯酶能够水解碘 化硫代乙酰胆碱，产生的硫代胆碱能使金纳米团簇的荧光猝灭，以此 U／mL一， 检测人体血液乙酰胆碱酯酶酶活。该传感器检测限为O．02 经济简便，灵敏性高。 3．基于纳米团簇对生成的H202敏感会导致荧光猝灭的现象构建 了一种选择性好、灵敏性高、简单无需标记的荧光传感器。乙酰胆碱 酯酶能够催化乙酰胆碱生成胆碱，通过胆碱氧化酶与胆碱发生的氧化 作用会生成H202，能强烈猝灭金纳米团簇的荧光，以此检测人体血 液中乙酰胆碱的浓度。该法检测乙酰胆碱的检测限低至5pM，与传 统检测方法比较具有一定的优势。 关键词：贵金属纳米团簇；生物传感器；乙酰胆碱酯酶；乙酰胆碱 ABSTRACT