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实验五 种子呼吸强度对温度的响应 呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一，在植物生理研究中常有测定必要。 学习呼吸强度的碱吸收测定方法； 了解环境因素（如温度）对呼吸强度的影响。 材料：萌发的小麦种子 仪器：呼吸测定装置； 酸式及碱式滴定管； 天平；温度计。 试剂：0.05 mol/L的Ba(OH)2； 1/44 mol/L草酸溶液； 酚酞指示剂。 1）取3个广口瓶（配橡皮塞），用碱式滴定管分别准确加入Ba(OH)2溶液20.00 ml，立即塞紧橡皮塞。 2）称取萌发种子15.0 g装在小篮子里，将小篮子挂在广口瓶内，塞紧瓶塞，轻轻摇动广口瓶（间隔5分钟）。分别置于4 ℃，室温，40 ℃ 三种不同条件下20 min。(3 瓶，操作间隔10 min) 3） 20 min后，小心打开橡皮塞，迅速取出小篮子，加入1~2滴酚酞指示剂，立即重新塞紧，用酸式滴定管于广口瓶内滴加草酸至红色突然消失为止，记下草酸用量ml数（V1）。 4）另取广口瓶一只，小篮内放用沸水煮死的种子，方法同上，仅做室温，记下用草酸ml 数（V2）。 V2：空白（死种子）滴定用去的草酸量（ml）； V1：样品滴定用去的草酸量（ml）； W：样品鲜重（g）； t：测定时间（h）。 1） 几个小篮子内放进的小麦种子重量一定要相同（15.0 g）。 2）反应中产生的BaCO3薄膜影响CO2吸收，间或摇动广口瓶； 3）开塞、加酚酞、盖塞要迅速，以防外界CO2 进入； 4）防止口中呼出的气体浸入瓶内； 5）把握红色消失第1点。 * * 单位？ 两种方法哪种更准确可靠？ 叶绿素含量的计算 呼吸作用（respiration)：是指生活细胞内的有机物，在一系列酶的参与下，逐步氧化分解成简单物质，并释放能量的过程。 呼吸速率(respiratory rate)：又称呼吸强度, 指单位时间内单位重量的植物材料释放的CO2的量或吸收O2的量。 在一定温度范围内，呼吸强度随温度的升高而增高，达到最大值后，温度继续升高时呼吸则下降。 时间/h 最适温度 最低温度 最高温度 温度对呼吸强度的影响 ??? 最适温度：指呼吸保持稳态的最高呼吸强度时的温度，一般为25～35℃(温带植物)。 最低温度：因植物种类、同一植物不同生理状态有很大差异。一般在0℃时呼吸就进行很慢。冬小麦在0～-7℃仍可进行呼吸。 最高温度：一般为35～45℃间。最高温度在短时间内可使呼吸速率较最适温度时要高，但温度越高时间越长，呼吸迅速下降；温度过高或过低都会影响酶活性，进而影响呼吸速率。 测定植物呼吸速率的方法 测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类：测定吸O2速率（测压法、氧电极法等）或者测定放出CO2速率（小篮子法、气流法、红外线CO2气体分析仪法等）。 测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收，样品用量少，且精确度高。 小篮子法是测定植物呼吸过程CO2的释放，虽然精确性差，但方法简便。 气流法适用于测定大量样品（如植物的块茎、块根、瓜果类）的呼吸速率。 利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确，是科研上常采用的方法。 1. 实验目的及意义 2. 实验原理 植物进行呼吸时放出CO2，计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量，即为该样品的呼吸速率。 1）呼吸放出的CO2可用Ba(OH)2溶液吸收 Ba(OH)2 +CO2 →BaCO3↓+ H2O 2）实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的Ba(OH)2溶液 Ba(OH)2（剩余）+ H2C2O4→BaC2O4↓+ 2H2O 3）从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量 3. 材料、仪器设备与试剂 4. 实验步骤 1）取3个广口瓶（配橡皮塞），装置如图所示。用碱式滴定管分别准确加入Ba(OH)2溶液20.00 ml，立即塞紧橡皮塞。 2）称取萌发种子15.0 g装在小篮子里，将小篮子挂在广口瓶内，塞紧瓶塞，轻轻摇动广口瓶（间隔5分钟）。分别置于4 ℃，室温，40 ℃ 三种不同条件下20 min。(3 瓶，操作间隔10 min) 3）20 min后，小心打开橡皮塞，迅速取出小篮子，加入1~2滴酚酞指示剂，立即重新塞紧，用酸式滴定管于广口瓶内滴加草酸至红色突然消失为止，记下草酸用量ml数（V1）。 4）另取广口瓶一只，小篮内放用沸水煮死的种子，方法同上，仅做室温，记下用草酸ml 数（V2）。 实验步骤 40 ℃ ---------- ---------- 沸水 室温 4℃ 呼吸速率(m