新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用.pdfVIP

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2015-09-30 发布于湖北
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新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用.pdf

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新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用.pdf

2013年5月色语 V01．31No．5 2013 Chinese May Journal 423～428 ofChromatography 研究论文 DOI：10．3724／SP．J．1 123．2013．01007 新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用范超卜!，宋子凤2 秦伟捷18，蔡耘¨，钱小红! L1．安徽医科久学研。丸牛学院，安徽食肥230032；2、军事队‘、#科学院放蝣‘o辐射阪。烈lJ}究昕北京蛋白质组研究中心蛋白质纵。、#旧家重点实验窒，北京 1022061 摘要：采用原子转移自由基聚合法制备了亲水聚合物修饰的硅胶颗粒作为一种新型固定化酶载体，在实现胰蛋白酶高密度固定的同时，显著降低了载体材料非特异性吸附导致的样品损失。因此，该固定化酶材料兼具高酶解效率和高回收率的特性。以标准蛋白质牛血清白蛋白(BSA)为样本，使用该固定化酶lmin即可完成酶解，鉴定到肽段对BSA的氨基酸序列覆盖率可达90％以上。该固定化酶材料成功应用于酵母菌全蛋白质复杂样本的酶解，从3min酶解产物中鉴定到666个蛋白质，超过同样条件下溶液酶解12h的鉴定结果。关键词：固定化酶；蛋白质组学；原子转移自由基聚合反应中图分类号：0658 文献标识码：A 文章编号：1000—8713(2013)05—0423—06 A on novelimmobilized modified trypsinhydrophilicpolymer silicabeadsfor characterization proteome 2 FAN Chao2．SONG WeOie4．CAIYunh，QIAN Zifeng!，QIN Xiaohong二 I Graduate JⅢiMedical State l Depa九’72elttq，An University，HcEei230032，China：2KeyLabm‘nfo，wq， Pl‘oteo-DzeResearch lnstituteRadiation ProgeoTtlics，Beijing Certler．BeOingqt Medieitie．Be磅“lg102206，ChnLo、 new ofimmobilizedwas modified Abstract：Atype trypsinpreparedusinghydrophilicpolymer radical silica atomtransfer by microparticl