硫化氢对缺血再灌注大鼠心脏保护作用及可能机制探讨.pdf

摘 要 遭受一定时间缺血的心肌组织细胞，恢复血流(再灌注)后，心肌组织损伤程 度迅速增剧的情况称为心肌缺血再灌注损伤。内源性的硫化氢(H2s)被誉为是继 一氧化氮(NO)和一氧化碳(co)之后的第三种重要的气体信号分子，它具有重要的 生理意义，在心血管系统，它有舒张血管降低血压、抑制血管平滑肌细胞增殖减 轻血管重构以及减少缺血时心肌梗死面积等多种生物学效应。本实验利用心肌缺 血再灌注的大鼠为模型，以硫氢化钠(NaHS)作为硫化氢的供体，在心肌缺血再 灌注模型上观察其存在的心肌保护作用。我们将手术大鼠分为3组，分别给予生 理盐水、硫氢化纳、硫化氢内源性抑制剂PAG，观察给药后各组大鼠血浆中硫化 氢浓度的改变、心电图及收缩压的差异及心肌梗死面积的改善情况。在此基础上， 我们对其保护作用的可能机制进行探讨，检测了在硫化氢的诱导下凋亡抑制蛋白 Survivin的表达情况，另外，我们怀疑硫化氢所发挥的保护作用与促进血管新 生有关，因此我们采用体外实验进行初步验证，并考察硫化氢对血管内皮生长因 子(VEGF)和缺氧诱导因子(HIF—la)表达情况的影响。 实验结果证实通过外源给入NaHS可以增加血浆中硫化氢浓度，降低再灌注 后收缩压的水平，有效减少心肌梗死面积，并且通过PCR及免疫组织化学检验， 发现硫化氢能够促进凋亡抑制蛋白Survivin的表达水平。体外结果表明，用NaHS 处理过的大鼠微血管平滑肌细胞(VSMC)的条件培养液能够增加大鼠脑微血管内 皮细胞(BCEC)在缺氧条件下的增值活性。PCR及Westernblot的结果表明， 硫化氢能够提高在缺氧条件下HIF一1a的稳定性，凝胶迁徙率实验(EMSA)证 明在硫化氢能够增强HIF-Iu与其下游基因VEGF的结合活性，从而上调VEGF 的表达。以上结果均表明，硫化氢确实对缺血心肌有保护作用，但其机制还需进 一步阐明，到底是从抗凋亡途径还是从促血管新生途径都有待进一步的实验证 明。 关键词：硫化氢，缺血再灌注，survivin，血管新生，缺氧诱导因子．1a，血管内 皮生长因子 中图分类号：R96 2 Abstract sulfide all molecule谢Ⅱl Hydrogenffl2S)，aSendogenousgas signaling functionthathasbeenfound a in importantbiological recently,mayplayprotection isehemic the of reperfusion(I／R)myocardium．Weinvestigated effect cardioprotective rats in modelofischemic invivoandits mechanism． H2S reperfusion possible Animalswere dividedinto3 and receivedeither randomly groups vehicle，Sodium Hydrosulfide(Nans)or for1 everyday weekbefore an