miRNA研究整套方案.pdf

microRNA 研究的整体解决方案 最新进展：TaqMan assays Amy Guo 过健英 amy.guo@ 小RNA研究—— Hot topics in the world ● 2000年，RNAi的研究进展被Science杂志评为重大科技突破。 ● 2001年，RNAi作为当年最重要的科学研究成果之一，再次入选“十大科技突破” 。 ● 2002年12月20 日，Science杂志将“Small RNA RNAi”评为2002年度最耀眼的明 星。同时，Nature杂志亦将Small RNA评为年度重大科技成果之一。 ● 2003年，microRNA的研究第四次入选“十大科技突破”，排在第四位。 ● 2005年，microRNA的研究第五次入选“十大科技突破” 。 ● RNA研究的突破性进展，是生物医学研究领域近20年来，可与HGP相提并论的最 重大成果之一。 2 © 2008 Applied Biosystems microRNA 基因组分布 ~62% are Intergenic ~34% are Intronic ~4% are Exonic ~15% of miRNAs in clusters miRNAMap: .tw/ Hsu, Huang, Hsu, Lin, Tsou, Tseng, Stadler, Washietl and Hofacker (2006), NAR 34:D135-139 3 © 2008 Applied Biosystems miRNA 的产生与功能 1. 在细胞核内转录成前体转录本 miRNA) 2. 被Rnase Ⅲ核酸酶Drosha 加工 成约70-90nt的发夹状pre-miRNA 3. 转运到细胞质被Dicer加工成成熟 的miRNA 4. 双链miRNA 分子被解链，单链的 miRNA 进入一个核糖蛋白复合体 miRNP ( RISC) 5. 通过与靶基因的3 UTR 区互补配 对，指导miRNP 复合体对靶基因 mRNA 进行切割或者翻译抑制。 *mature active strand 4 © 2008 Applied Biosystems microRNA ● 成熟的MicroRNA(miRNA)是一种 22个nt左右的内源性单链小分子 RNA ● 由带茎环结构的双链RNA前体剪切 而成 ●