生殖支原体粘附素蛋白MgPa的表达及其多克隆抗体的制备与纯化.pdfVIP

曾壅堡笠生蕉塞厦签整瞪苤堡自丛出笪壹姿盈基垒壹隆埴签数趔鱼皇丝丝筮!!塑 ·101l· doi：10．3969／j．ism．1000-484X．2010．11．011 生殖支原体粘附素蛋白MgPa的表达及其多克隆抗体的制备与纯化① 曾焱华吴移谋游晓星詹利生粟盛梅邓红玉 (南华大学病原生物学研究所，衡阳421001) 中国图书分类号R392-33文献标识码A 文章编号1000-484X(2010)11．1011．05 [摘要】 目的：制备并纯化生殖支原体(№)粘附素蛋白(MgPa)的多克隆抗体，为进一步探讨MsPa的生物学功能及其 在Mg的临床诊断与预防方面的应用提供实验基础。方法：构建原核表达载体，在大肠杆菌中诱导表达生殖支原体粘附素蛋 白(rMsPa’)，重组蛋白经Western 酸铵法和溴化氰活化的琼脂糖4B亲和层析柱纯化多克隆抗体，并经Westernblot鉴定免疫血清的特异性，用间接ELISA法检测 免疫血清的效价。结果：在大肠杆菌中成功表达一分子量约为37 kD的6×His-rMgPa’融合蛋白，免疫新西兰兔后获得了相应 的多克隆抗体，利用饱和硫酸铵法和亲和层析法纯化后得到具有较高纯度的