天冬氨酸氨基转移酶测定试剂培训材料.docVIP

天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒培训材料 一 初级部分：（原理、临床意义、规格） 天冬氨酸氨基转移酶（英文名称：Aspartate Aminotransferase）简称AST，本公司生产的天冬氨酸氨基转移酶试剂采用的是IFCC推荐的连续监测法。 临床意义： 天冬氨酸氨基转移酶的测定是医院临床检测人体生化肝功能的主要项目，也是肝炎诊断的重要指标之一，天冬氨酸氨基转移酶的测定对肝脏疾病诊断具有重要的意义。 原理： 本法是以IFCC推荐法为基础。反应原理为： L-天冬氨酸 + α-酮戊二酸 ＋ L-谷氨酸 ＋ NADH + H＋ L-苹果酸 ＋ NAD+ + H2O 货号 规格 适用仪器 通用单试剂 AS10911 20ml×5 适用于半自动和全自动生化分析仪 AS10912 75ml×4 日立专用包装 AS10920 R1 60ml×4 R2 60ml×2 日立7170、7080、7180、7600、Olympus AS10930 R1 50ml×4 R2 50ml×2 日立7020 AS10940 R1 80ml×2 R2 40ml×2 日立7060、7150、岛津、Abott2000 贝克曼 （封闭通道） AS10950 200test×2 贝克曼CX系列生化仪 东芝 AS10960 R1 50ml×4 R2 50ml×2 东芝30FR/40FR 二中级部分:（试剂特性、测定参数、常见问题解答） 易出现的问题及解答： 测定参数： 手工法参数： 反应温度 37℃ 反应主波长 340nm 反应副波长 405nm R1∶R2 2∶1 试剂量∶样本量 15∶1 延迟时间 1min 读数时间 1min 比色杯光径 1.0cm 日立7020、7080参数： 双试剂： 主波长 340nm 副波长 405nm R1 200μl R2 100μl 样品量 20μl 测定方法 速率A 反应时间 10min 第一测光点 21 最后一测光点 30 反应方向 下降反应 单试剂： 主波长 340nm 副波长 405nm 试剂量 225μl 样品量 15μl 测定方法 速率A 反应时间 10min 第一测光点 5 最后一测光点 11 反应方向 下降反应 结果计算： ΔA/min=A2-A1 ALP（U/L）= = ΔA/min×K A1 = 第一测光点的吸光度 A2 = 最后一测光点的吸光度 TV= 总反应体积（ml） SV= 样品体积（ml） 6．22= 340nm处NADH毫摩尔消光系数 P= 比色杯光径 理论因子数K=2572 由于各厂家AST试剂配方有所不同，因此在第一次使用时，请先用标准品进行定标，以定标得出的实际因子数K为准。 质量控制： 为保证测试结果可靠，每批样品测试时，同时测定质控血清。 标本的收集与处理： 血清或用EDTA、肝素抗凝的血浆均不应溶血。AST在4℃下至少可稳定7天。 储存血清AST的活性会缓慢增高，建议采血当天测定AST活力。 试剂组成 NADH 0.28mmol/L EDTA 4.0mmol/L L-天冬氨酸 260mmol/L 乳酸脱氢酶 3.0KU/L ａ-酮戊二酸 14mmol/L MDH 1.0KU/L Tris 100mmol/L 参考值： 温度 37℃（U/L） 37℃（μkat/L）） 女性 0～25 0～0.42 男性 0～30 0～0.50 各实验室应确定自己的正常值参考范围。 主要技术参数： 线性范围：0～1500U/L，r2≥0.990(双试剂) 0～550U/L，r2≥0.990(单试剂) 批内精密度：CV≤5% 批间精密度：CV≤5% 准确度：不准确度≤10% 注：上述指标在日立7020、7080上通过第三方检测。 注意事项： 1.单试剂