优化培养条件下人脂肪干细胞视网膜神经的保护作用与研究.pdf

优化培养条件下人脂肪干细胞的视网膜神经保护作用的研究                                      中文摘要  优化培养条件下人脂肪干细胞的视网膜神经保护作用的研究 中文摘要 目的：检测多能成体祖细胞（MAPC ）的培养条件对人脂肪干细胞（hADSCs ） 生长的影响，旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。 方法：通过细胞形态观察、MTT 实验、克隆形成率、PCR 检测、以及成脂、 成骨、成软骨分化潜能检测等，研究 MAPC 培养条件下 hADSCs 的特征，并用 MAPC 培养处理的 hADSCs 进行 RCS 大鼠视网膜下腔移植，通过视网膜电图（ERG ）和 TUNEL 检测，判断细胞移植治疗对视功能及视网膜细胞凋亡的影响。 结果：MAPC 培养处理的 hADSCs 细胞增殖能力及克隆形成率均增强，形成的 克隆较大且可稳定传 10 代以上，且具有成脂、成骨、成软骨的多向分化潜能，细 胞表面标记物及细胞因子出现差异表达：CD140b 、CD90 、CD47、HGF 和 PEDF 显著上调，CD73、CD105 和 IL-6 显著下调。与未治疗的 RCS 视网膜相比，移植 MAPC 培养条件处理的 hADSCs （P4 ）3 周后，RCS 大鼠的 B 波波幅明显升高，外 核层细胞凋亡明显减少。 结论：MAPC 培养条件处理的 hADSCs 显示出更好的视网膜神经保护作用，适 合用于治疗视网膜退行性疾病。 关键词：多能成体祖细胞；人脂肪干细胞；视网膜变性疾病；细胞移植 作 者：娄 慧 指导教师：徐国旭 I Abstract 优化培养条件下人脂肪干细胞的视网膜神经保护作用的研究 Human adipose-derived stem cells cultured in modified conditions show improved protective functions to retinal neurons Abstract Objective: To investigate the effects of multipotent adult progenitor cell (MAPC) culture conditions on biological characteristics and therapeutic effects of human adipose- derived stem cells (hADSCs), thus to obtain optimal donor cells for treatment of retinal degeneration (RD). Methods: The cell morphology, MTT assay, clone formation, adipogenic, osteogenic, chondrogenic differentiation potential and qRT-PCR technique were performed to detect biological characteristics of hADSCs. The hADSCs were cultured under MAPC culture conditions and transplanted into the subretinal space of RCS rats. The retinal protective functions were evaluated by electr