人NESG1基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达.pdfVIP

201 SouthMed · 65· 1；31(1) 南方医科大学学报(J Univ) ·基础研究· 人NESG 1基因慢病毒载体的构建及其在293FT细胞中的表达 刘真1，甄艳2，于晓黎2，江庆萍3，龙捷1，方唯意2 三医院病理科，广东广州510150 装慢病毒，感染293FT细胞并进行鉴定。方法以NESGl全长克隆为模板扩增其编码框序列，通过限制性内切酶Agel酶 切、T4 受态细菌，筛选阳性克隆，经PCR及测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染人胚肾细胞系293FT．进行慢 病毒包装并测定病毒滴度。病毒感染293FT细胞，荧光显微镜下观察感染效率，Westernblot方法检测NESGI．EGFP融合 证实细胞表达NESGI。结论成功构建NESG 1慢病毒表达载体，包装得到高滴度慢病毒，为后续感染鼻咽癌细胞，探索 其在鼻咽癌发生和发