p53及γ-h2ax作为乙醛引起dna损伤早期生物标记物de实验研究【期刊】.pdfVIP

1 第 26 卷 第 2 期 4 论 著 3 月 Changes of p53 and p53和γ-H2AX作 γ-H2AX of TK6 cells 为乙醛引起DNA损 caused by acetaldehyde 伤早期生物标记物 的实验研究 1 2 ZHOU Xue-xian ， Penny Jones ， 2 1，* 1 2 Paul Carmichael ， HAO Wei-dong 周学贤 ，Penny Jones ， (1. Beij ing Key Laboratory of Toxicological Research and Risk 2 1，* Paul Carmichael ，郝卫东 Assessment for Food Saf ety, Department of Toxicology, School （1．北京大学公共卫生学院毒理学系，食品安全 of P ublic Health, Peking University, Beij ing 100191, China; 毒理学研究与评价北京市重点实验室，北京 2. Unilever, Saf ety Environmental Assurance Centre, 100191，中国；2．英国联合利华安全与环境保障 Bedf ord Shire, MK44 1LQ, UK) 中心，贝德福德郡 MK44 1LQ，英国） 【摘要】目的：评价乙醛染毒p53野生型人类淋巴母细胞(TK6)后，细胞中DNA损伤标记物p53、γ-H2AX的表达变化，并与彗 星试验 中的DNA链断裂指标进行敏感性 比较，探讨p53和 γ-H2AX 作为乙醛引起DNA损伤 的早期生物标记物的可能 。方法： 乙醛 在0.5~20 mmol/L的浓度范 围分别染毒TK6细胞20 min、2和 12 h后，采用高通量 的流式细胞术检测肿瘤抑制蛋 白total-p53、磷酸化 p53(p-p53)以及磷酸化组蛋 白(γ-H2AX)的细胞表达率和表达强度(平均荧光强度)； 同时采用碱性彗星试验检测 乙醛引起 的DNA链 断裂指标(细胞拖尾率 、尾长 、尾部DNA百分含量 以及尾矩)的变化 。结果： 乙醛染毒TK6细胞 12 h后， γ-H2AX的表达强度在 15及 20 mmol/L浓度下显著升高(P0.05)，p-p53的细胞表达率在0.5~7.5 mmol/L浓度范围内呈现剂量依赖的升高趋势，total-p53的细胞表 达率趋势与p-p53相似，但与阴性对照组相 比，差异无统计学意义 。彗星试验 中，细胞拖尾率 、尾长 、尾部