叠氮二乙基铝合成及其相关反应的研究.pdfVIP

维普资讯 第 7期 无 机 化 学 学 报 VO1．18．No．7 2002年 7月 CHINESEJOURNALOFINORGANIC CHEMISTRY ju1．．2002 人锰超氧化物歧化酶的紫外可见吸收光谱研究 李连之 ， 欧阳砥 邱晓航 胡绪英 。 周永洽 申泮文 (聊城师范学院化学系，聊城 252059) (南开大学化学系，天津 300071) 研究 了重组人锰超氧化物歧化酶 (MnSOD)的紫外可见吸收光潜。经光学 电负性和摩尔 收系数分析，重新 归属 了酶 Mn(IⅡ)的可见光谱，首次报道 了酶中Mn(II)的电荷转移光谱 。研究灰 1月【，MnSOD中显示 的电荷转移谱带 部赴山His咪唑』占7r 轨道向金属轨道的 LMCT跃 迁。 关键词 锰超氧化物歧化酶 紫外可见光谱 电荷转移光谱 光学 电负性 分类号 06l4 24 在金属酶和金属蛋 白研究中，锰中心的研究尚 谱的解释却完全不同。近期，Whittaker等人 又研究 处于初步阶段 ’引。分离 自原核生物 ’的锰超氧化 了MnSOD的单晶偏振光谱，将 500rim附近的强偏 物歧化酶 (MnSOD)金属中心的结构曾被详细研究 振光谱归属于 Mn配体天 冬氨酸的羧基氧到 Mi1 过。Wagner等人 对人 MnSOD和嗜热菌 MnSOD进 (Ⅲ)的电荷转移光谱 (LMCT)。另一点值得注意的是． 行 了x一射线单 晶分析，分辨率为 8。0～3。2A。 MnSOD中Mn(1I)中心的光谱从未见有报道 。因此． Borgstahl等人 的人线粒体 MnSODX．射线单 晶分 我们研究了重组人 MnSOD的紫外可见吸收光潜和 析，分辨率达到 2．2A。人线粒体 MnSOD活性中心取 示差光谱，利用光学电负性和摩 尔吸收系数数据分 三角双锥结构，与锰离子配位 的基团在赤道平面上 析，重新归属 了Mn(HI)的谱带，首次报道 了Mn(Ⅱ)的 为 His．74、His一163和 Asp159，在轴向为His一26和 电荷转移光谱。 一 个 H!O分子 。配位原子在赤道平面上为两个组氨 1 实验部分 酸的咪唑氮和一个天门冬氨酸的羧基氧 。轴 向为一 个组氨酸的咪唑氮和一个来 自水分子 的氧原子 。 1．1 材料 、试剂和仪器 Keele等人 13从大肠杆菌分离得到 了仅含 Mn 羧 甲基纤维素 (CM一52)(Serva产品)，二乙基胺 (Ⅲ)的MnSOD，他们观察到在 420nm附近有一条谱 基乙基纤维素 (DEAE一52)(Whatman产品)，三羟 甲 带，在长波长一侧有明显肩峰。他们把此谱带归属 基氨基 甲烷 (Tris)(A．R．，华美生物工程公司)，脲 、 为 Mn—L的电荷转移跃迁 。植物 MnSOD的光谱研 EDTA、邻苯三酚等均为分析纯试剂 。 究I表 明，在 370～400nm附近和 57l～606nm 附近 UV一240紫外可见分光光度计 (日本 岛津 ) 观察到一对肩峰。前者可能为 Mn—L电荷转移峰，后 DU一8B紫外可见分光光度计 (Beckman)，pHS．2C型 者可能为 d—d跃迁 。Whittakel·等人l8同样由大肠杆 精密酸度 汁(上海雷磁仪器厂)。 菌分离得到 MnSOD，在 400～667nm附近观察到一 1．2 MnSOD的制备 个带肩峰的宽峰，经 Gaussian分解，把这组峰都归 采用文献 ¨“的方法，并进行改进 。将含有重