金黄色葡萄菌表面蛋白的原核表达、纯化及免疫效应研究.pdfVIP

V6100 76 金黄色葡萄球菌表面蛋白的原核表达、纯化 及免疫效应研究 周 宏 摘要金黄色葡萄球菌(Staphylococcus 程度的感染：一个不太严重的伤口感染可发展为恶性的败血症、骨髓炎、脓毒性 关节炎或是心内膜炎。Saureus更是医院感染中最常见的病原菌之一。甲氧西林 抗性的金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistantS 数I艋床上应用的抗生素。令人忧虑的是。MRSA菌株对治疗葡萄球菌感染最为有 效的抗生案——万古霉素的敏感性日益降低，这些对万古霉索不敏感的金黄色葡 菌感染不能治愈的恐惧感，因此必须寻找到一种有效的治疗方法。 研究表明，基于金葡菌细胞外结合基质蛋白(ECMBPs)的重组蛋白疫苗对 于机体更有保护效果。基于PCR技术，分别扩增了纤违蛋白结合蛋白(FnBP)和 融台蛋白Cna．为获得更为广谱的双价疫苗候选蛋白，利用重叠号}物延伸PCR技 测定各组与对照组相比抗体滴度有大幅升高(10s)。淋巴细胞增殖实验初步表明， 所获抗原具良好的细胞免疫应答的效果。末次免疫后一周进行攻毒实验，初步的免 strain 疫保护实验表明，S．auleUSS-6，5×10 组)、远比Control组(25％)为两。经Western Blot分析，我们所得抗原与免爱动 物的抗血清有良好的结合活性。 结论我们所获的金黄色葡萄球菌表面蛋白是可溶性的，较好地保持了其免疫 原性，实现了其在大肠杆菌中的高量表达：我们首次尝试将金葡菌的厂仃b和ona 基因连接起来，构建双价疫苗从而扩大了蛋白疫苗的保护范围。使之可以防治绝 大部分金葡菌株；动物实验表明，这些蛋白具有良好的体液免疫和细胞免疫应答 的效果；开发金葡菌ECMBPs重组疫苗具良好的应用前景。 关键词金黄色葡萄球菌：纤连蛋白结合蛋白；胶原蛋白结合蛋白；表达与 纯化；疫苗：免疫效应 、 iI and on effect studyimmunological Cloning，expressi9n，purification aureussurface ofStaph)7lococcusproteins Z／-／OU Hong of of Abstract aureuscausesanumberinfections Staphylococcus varyingseverity woundinfectionswhichcarl tocomplicatedsepticaemia， incomplicated progress arthritisorendocarditis．SaureusisoneofthemoreconuYlon osteomyelites，septic bacterial serious S speciescausing h