多肽物质分离与分析方法研究进展.pdfVIP

( ) 48 《中国海洋药物》杂志2000 年第 3 期 总第 75 期 ·专题讲座· 多肽物质分离与分析方法研究进展 赵　锐　顾谦群　管华诗 (青岛海洋大学海洋药物与食品研究所, 青岛　266003) 摘　要　综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法, 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁 共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。 关键词　多肽, 分离, 分析, 进展 　　多肽类化合物广泛存在于自然界中, 其 有利的方法手段, 因为蛋白质、多肽的H PL C 中对具有一定生物学活性的多肽的研究, 一 应用与其他化合物相比, 在适宜的色谱条件 直是药物开发的一个主要方向。生物体内已 下不仅可以在短时间内完成分离目的, 更重 知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、 要的是 H PL C 能在制备规模上生产具有生 分泌细胞和体液中产生或获得的, 生命活动 物活性的多肽。因此在寻找多肽类物质分离 中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病 制备的最佳条件上, 不少学者做了大量的工 变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。随着 作。如何保持多肽活性、如何选择固定相材 现代科技的飞速发展, 从天然产物中获得肽 料、洗脱液种类、如何分析测定都是目前研究 类物质的手段也不断得到提高。一些新方法、 的内容。 新思路的应用, 不断有新的肽类物质被发现 111　反相高效液相色谱 ( ) R P H PL C 应用于防病治病之中。本文介绍了近几年肽 结果与保留值之间的关系: 利用 R P 类物质分离、分析的主要方法研究进展。 H PL C 分离多肽首先得确定不同结构的多肽 在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留 1　分离方法 系数, W ilce 等[ 2 ] 利用多线性回归方法对 采取何种分离纯化方法要由所提取的组 2106 种肽的保留性质与结构进行分析, 得出 织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白 了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系, 质、多肽提取分离常用的方法包括: 盐析法、 其中极性氨基酸残基在 2～ 20 氨基酸组成的 超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交 肽中, 可减少在柱上的保留时间; 在 10～ 60 换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解 氨基酸组成的肽中, 非极性氨基酸较多也可 [ 1 ] 法等 。这些方法常常组合到一起对特定的 减少在柱上的保留时间。而含 5～ 25 个氨基 物质进行分离纯化, 同时上述这些方法也是 酸的小肽中, 非极性氨基酸增加可延长在柱 蛋白、多肽类物质分析中常用的手段, 如层 上的保留时间。同时有不少文献报道了肽链 析、电泳等。 长度、氨基酸组成、温度等条件对保留情况的 11　高效液相色谱(H PL C ) 影响, 并利用计算机处理分析