氧自由基吸收能力测定仪器及方法的考察.pdfVIP

· 414 · 安 徽 医 药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2011Apr；15(4) ◇药学研究◇ 氧 自由基吸收能力测定仪器及方法的考察 邵卫梁，杭晓敏，胡天喜，张 蔚，戴颜韵 (上海交大昂立股份有限公司，上海 200233) 摘要 ：目的 利用国产多功能荧光分析仪 ，开发建立氧 自由基吸收能力 (oxygenradicalabsorbancecapacity，ORAC)分析测定方 法。方法 分别考察了荧光剂FL、过氧 自由基启动剂AAPH、抗氧化剂标准品Trolox的测定浓度以及浓度与荧光衰减曲线下积 分面积(AUC)的线性关系；仪器稳定性方面做了批 内和批 间稳定性试验。结果 FL、AAPH、Trolox测定浓度范 围分别为 0．00063～0．0063Ixmol·L一、3．50～5．25Ixmol·L 和0．002—0．005Ixmol·L～。其中Trolox的浓度与AUC呈很好的线性 关系。批间稳定性试验的变异系数为 7．7％。符合美国农业部许可的ORAC分析结果误差的变异系数 ≤15％要求。结论 建 立了以国产多功能荧光测定仪进行ORAC分析测定的方法，测定结果符合 ORAC分析要求，可信度较高。 关键词：ORAC；食品；抗氧化评估 ；荧光分析仪 Improvedmethod0foRAC assayandthestabilitv SHA0 Wei．1iang，HANG Xiao．ming，HU Tian．xi，etal (ShanghaiJiaodaOnllyCO．，Ltd，Shanghai 200233) Abstract：Aim Toestablishtheoxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)assaywithdomesticmultifunctionalfluorescenceanalyzer． M ethods TheconcentrationofSodum Fluoresceinwastestedasfluorescentprobe．AAPH asfreeradicalinitiatorandTroloxasequiva． 1ents．AlsotheconcentrationofTroloxandits1inearrelationwithintegralareaunderthecurve(AUC)offluorescencedecayweretested． Stabilityoftheapparatuswasobserved．Resuits TherangeofconcentrationofFL．AAPH andTroloxinanalysiswere0．00063—0．006 3txmol·L～ ．3．50—5．25panol·L and0．002—0．005 Ixmol ·L respectivelywith goodlinearrelationbetweenconcentrationof Troloxand(AUC)offluorescencedecay．Theintre—assayCVsof5sampleswas7．7％ whichwaslessthan15％ ．theacceptableCVofthe 0RAC assaybyU．S．DepartmentofAgriculture．Conclusion 0RACassaywithdomesticfluorescenceanalyzerhasbeenestablished． Keywords：0RAC；food；antioxidantevaluation；fluorescenceanalyzer 近年来，越来越多的研究发现，人体的衰老和很多疾病都 近年发展起来的荧光法及化学发光法都用于测定样品反 与活性氧 (ROS)有关 。ROS可以促发 自由基介导的氧化 应过程中产生的自由基。其中化学发光法是一种迄今为止最 反应，通过破坏细胞膜稳定性 ，损伤 DNA ，氧化低密度脂 灵敏的方法，但由于灵敏度高，因此稳定性成了很突出的问 蛋白(LDL)等，诱发细胞衰老 ，变异 J，癌变 和各种心脑 题 。