分子印迹技术用于生物大分子的识别.pdfVIP

《生物工程进展》2001 ,Vol. 21 ,No. 5 技术与 方法 分子印迹技术用于生物大分子的识别　　　　 罗 　晖 　孙瑞丰 　沈忠耀 (清华大学化工系　北京　100084) 摘要 　分子印迹技术是一种人工合成具有分子识别功能的介质的一种新技术 ,近年来在许多领域 都得到很大的发展。本文介绍了分子印迹技术的发展现状 ,尤其对生物大分子的分子印迹技术进 行了详细论述 ,对生物大分子印迹采用的功能单体、印迹分子的种类、印迹的方法、印迹的机理、存 在的问题和应用的前景等分别进行了讨论。 关键词 　分子印迹 　分子识别 　生物大分子 　蛋白质 细胞和酶在任何步骤中都不去除。 前言 目前分子印迹技术应用的领域十分宽广,如手 近几十年来生化分离技术有了飞速的发展 ,人 性物质分离、生物传感器、模拟抗体与受体、酶模拟 们根据不同的原理开发出了很多新型的分离技术 , 催化等[3 ] ,应用于分子印迹的物质十分广泛 ,如金属 如根据分子大小进行分离的凝胶过滤层析和 SDS 离子、氨基酸及其衍生物 ,碳水化合物 , 蛋白质 , 核 PAGE 电泳,根据分子等电点进行分离的等电聚焦 酸 ,激素 ,杀虫剂 ,酶或辅酶等[4 ,5 ] 。因此分子印迹技 电泳,根据分子带电性质进行分离的离子交换色谱 , 术在生物大分子的应用领域具有广泛的应用前景 , 根据分子疏水性质进行分离的疏水色谱和反相色 如对蛋白质、核酸和多糖的印迹 ,甚至对整个微生物 谱 ,根据生物分子亲和性进行分离的亲和分离技术 细胞的印迹等等。 等等。其中生物亲和分离的特异性最好 ,但由于生 分子印迹技术区别于其他分离技术的一个显著 物亲和物质的发现和分离十分困难 ,人们一直希望 不同之处是制备分离介质前必须先获得待分离物质 能够人工合成具有类似生物分子亲和识别能力的介 的纯品。如果这种物质较为难得或价格昂贵 ,那么 质 ,而根据分子的大小、空间结构和电荷分布进行分 这就可能成为该技术的一个潜在的缺点。人们很早 离的分子印迹技术使得这一希望很可能得到实现。 就对生物大分子的印迹表示出了兴趣 ,用于印迹的 从 70 年代开始 , 随着 Wulff [1 ] 和 Mosbach[2 ] 等人在分 蛋白质种类也是多种多样的 ,如表 1 所示。 子印迹技术领域的开拓性工作 ,这一技术得到了蓬 表 1 　已被用于印迹的蛋白质分子 勃发展 ,分子印迹技术由于其卓越的分子识别性能 印迹蛋白质 文献 已成为一个热门研究课题。 ( ) Transferrin , BSA bovine serum albumin [6 ] 分子印迹技术的核心是制备分子印迹聚合物 Ribonuclease A [7 ] (molecularly imprinted polymer , MIP) ,制备方法为 :将