初始污染菌校正因子的测定报告.docVIP

深圳市麦瑞科林科技有限公司 初始污染菌校正因子确认报告 文件编号：___________ 版 本 号：___________ 受控状态：___________ 分发编号：___________ 持有部门：___________ 2010-06-03发布 2010-06-10实施 编制： 审核： 批准： 目 录 1 概述 2确认依据 4 确认过程 3．1 洗脱液的制备 3．2 营养琼脂培养基的制备 3．3 接种 3．4 培养 3．5 菌落计数 5 校正因子的计算 6 确认结论 7 再确认 1 概述 公司制定的《初始污染菌检测作业指导书》是用于描述产品中的活微生物群体。但准确地确定初始污染菌是不可能的，因此，在实践中，采用校正因子将活菌计数转换成产品中初始污染菌评估，此因子用于补偿洗脱效率。 2 确认依据 ISO 11737.1-2006医疗器械的灭菌 微生物方法 第1部分：产品上微生物总数的测定方法进行测定。 3 确认过程 3．1 洗脱液的制备：分别选取三支新制备的样品一次性使用采血针、宫颈采样拭子，在净化工作台上，用无菌剪刀将每支样品剪碎，称重，放入事先灭菌的具塞三角瓶中，加入约（样品重量×10）ml的pH7.0 氯化钠-蛋白胨灭菌洗脱液，加塞，充分震荡，使样品得到充分的洗脱，然后将洗脱液转移到另一个无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。 3．2 营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制，然后在121℃高压蒸气消毒器内灭菌15min，放入50℃左右的水浴中备用。 3．3 接种：在净化工作台上，用移液管吸取1ml上述制备的洗脱液注入经过灭菌的平皿内，将约15-20ml已融化的45℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注1ml灭菌洗脱液于营养琼脂培养基内作为空白对照。 3．4 培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于36±1℃恒温箱中培养48±2h。 3．5 菌落计数：记录各平皿中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积数（ml），即得到洗脱液中的全部菌落数。 重复3.1-3.5步，分别进行第二次、第三次、第四次、第五次洗脱，其中第五次洗脱为直接将四次洗脱后的产品接种于培养基内，将五次洗脱后所得的菌落数分别填入数据表1、表2。 校正因子的计算 用第一次洗脱液得到的菌落数除以五次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，取三套样品的第一次冲洗去除率的平均值，平均值的倒数即为校正因子。 确认结论 由表1、表2可知，照此检查方法和检查条件进行一次性使用采血针、宫颈采样拭子的校正因子的测定，其结果分别为1.34、1.24。 7 再确认 a）洗脱液的组分发生变化时，其校正因子应重新确认； b）产品的组分或原灭菌工艺发生变化时，其校正因子应重新确认。 表2一次性宫颈采样拭子校正因子测定数据表 测定项目 样品1 样品2 样品3 第一次洗脱 96 102 88 第二次洗脱 17 21 13 第三次洗脱 4 6 6 第四次洗脱 0 2 0 （直接培养） 第五次洗脱 0 0 0 空白对照 0 0 0 总集群数 117 131 107 第一次洗脱去除率% 82.1 77.9 82.2 平均去除率 80.7% 校正因子 1.24 检测人/日期：刘晓琴2010-05-20 复核人/日期：朱德明2010-05-20