Aβ在脾阴虚糖尿病脑病大鼠脑组织的表达及滋补脾阴方药作用机制.pdf

Ap在脾阴虚糖尿病脑病大鼠脑组织的表达 及滋补脾阴方药作用机制 硕士研究生： 闰 云 指导教师： 战丽彬教授 专业名称： 中西医结合临床 摘 要 目的：糖尿病脑病是糖尿病的慢性并发症之一，但目前糖尿病脑病 的发病机制还不十分清楚。大量的流行病学调查证实了阿尔茨海默病 (Alzheimer’Sdisease，AD)与糖尿病这两种疾病发病的相关性，发现糖尿 病是AD的危险因素之一。AD的主要病理特征是神经细胞外大量以D． 淀粉样蛋白(amyloidppeptide，Ap)沉积为主的老年斑(senileplaques， SP)、神经细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary 的聚集和沉积促发炎症级联反应、神经原纤维缠结、轴突损伤和突触丢 失及神经元变性甚至死亡，影响认知功能。因此研究AD在糖尿病脑病中 沉积情况有助于理解糖尿病脑病的发病机制，并为防治糖尿病脑病提供 新方向和新思路。 滋补脾阴方药(Zibu Piyin 《不居集》的资成汤为基础并结合多年实践化裁而成，以滋补脾阴为立 方原则，针对脾阴虚证而设。本课题组以往研究表明，ZBPYR具有显著 的神经保护和抗脑衰老作用；具有抗ADl—40毒性改善脾阴虚痴呆大鼠学 习记忆障碍及保护原代海马神经元的作用。因此本实验进一步观察 ZBPYR是否对脾阴虚糖尿病脑病大鼠存在脑保护作用并探讨其保护机 制。 方法： 1．将健康成年雄性SD大鼠随机分为空白对照组、脾阴虚组、糖尿 病脑病组、脾阴虚糖尿病脑病组和脾阴虚糖尿病脑病+ZBPYR组，共5 组。 2．首先采用高脂饮食加低剂量链脲佐菌素(30mg／kg，腹腔注射)制备 2型糖尿病模型，在此基础上用饮食不节、劳倦过度、耗伤阴液的复合 因素方法建立脾阴虚证模型。停止施加造模因素后，对脾阴虚糖尿病脑 病大鼠给予ZBPYR干预，并观察各组大鼠的体征变化。 3．通过跳台测试和Morris水迷宫测试进行行为学检测，比较各组大 鼠空间学习记忆能力的变化。 4．通过免疫组织化学法检测各组大鼠海马Ap沉积情况；通过 Wersten blotting方法检测各组大鼠海马GSK-3 表达的变化。 结果： 后糖尿病模型大鼠出现了多饮、多食、多尿等表现，葡萄糖耐量异常 (P0．01)，胰岛素耐量异常，空腹血清胰岛素水平无显著变化(PO．05)。 2．脾阴虚组出现体重下降、肛温升高、饮水量增加等阴虚内热征象。 行为学结果表明糖尿病脑病组、脾阴虚糖尿病脑病组学习记忆成绩降低 改善(P0．05)。 3．免疫组化检测发现糖尿病脑病组和脾阴虚糖尿病脑病组海马神 降低了脾阴虚糖尿病脑病大鼠海马神经元胞浆AD表达(PO．05)。 4．Wersten 性差异。与对照组相比，糖尿病脑病组和脾阴虚糖尿病脑病组海马 GSK．3a(Ser2 尿病脑病+ZBPYR组海马GSK．3a(Ser21)磷酸化水平无显著变化 (尸0．05)。 结论： 1．高脂饮食加低剂量链脲佐菌素制备的2型糖尿病模型基础上建立 脾阴虚证模型，所建立的脾阴虚糖尿病脑病病证结合模型能够较好的模 拟临床糖尿病脑病的行为学改变，可作为较好的糖尿病脑病的动物模型。 2．糖尿病脑病认知功能障碍可能和脑A13表达增加有关。 3．ZBPYR可显著改善脾阴虚糖尿病脑病大鼠的学习记忆障碍。 4．ZBPYR提高脾阴虚糖尿病脑病大鼠学习记忆能力的作用可能和 脑组织Ap表达的下降有关，这可能不依赖于GSK．3a活性的抑制。 GSK．3ct 关键词 脾阴虚糖尿病脑病滋补脾阴方药A13 The of inBrainTissuesof A13I Expression Spleen-Yin Diabetic