AngⅡ对高血压患者肠系膜动脉血管平滑肌细胞BKCa影响及AT2R表达相关性及.pdf

II对高血压患者肠系膜动脉血管平滑肌细胞BKca的 Ang 影响及与AT2R表达的相关性研究事 摘 要 病和多发病，其基本病理特征是阻力动脉的张力持续增加。血管平滑 —／、 smooth 肌细胞(vascularmuscle conductance 血管张力的调节，其中大电导钙激活钾通道(1arge calcium—activated potassium II， 的重要机制，呈现负反馈调节方式。血管紧张素II(angiotensin 1 II)作为一种有效的内源性缩血管活性物质，通过血管紧张素II Ang II 1 型受体(angiotensintypereceptor，ATlR)发挥收缩血管的作用； 然而近年来却发现，Ang II通过 II可以舒张肠系膜动脉。研究证实Ang 作用于血管紧张素II II 2 2型受体(angiotensintypereceptor，AT2R)， 引起BKca的开放，导致细胞膜超极化，进而舒张肠系膜动脉。这样就 提出了一个关于AngII的非内皮依赖的血管舒张作用的新观点，它对 我们深入理解高血压的发生和发展机制有重要的意义。因此，探讨在 lI 高血压的情况下，AT2R表达的变化以及由此是否引起B＆a对Ang 反应性的改变是有必要的。本实验采用单通道膜片钳技术和免疫印迹 法(Westem II的作用机制及其与AT2R和高血压之 blot)，探讨Ang 间的关系，为阐明其扩张肠系膜动脉的机制及AT2R的血管保护性作 ’国家自然科学基金资助项目(№ 用提供实验依据。方法：(1)单通道膜片钳实验：2l例接受腹部手术 的患者分为两组：高血压(HT组)未长期规律服用抗高血压药的8例、 mmx2 正常血压(NT组)13例，分离其肠系膜动脉，纵向剖开剪成2 mm的组织条块，置于酶液中进行两步消化。选取立体感较强，表面 光滑的平滑肌细胞进行实验，在对称性高钾溶液中，采用膜片钳细胞 贴附式和内面向外式记录BKca电流。电流信号经膜片钳放大器 6．0软件采集电流， CEZ．2200放大，滤波处理后输入计算机，经pClamp 10．1软件系统进行数据分析。血管平滑肌细胞先经ATlR阻断 Clampfit 剂缬沙坦10州预处理10分钟后，分别观察在细胞贴附式和内面向外 II对B＆a的作用，比较Ang 式膜片下Ang blot II对BKca的激活。(2)Westem 电流的作用及AT2R是否介导了Ang 检测AT2R的蛋白水平：27例接受腹部手术的患者分为两组：高血压 (HT组)14例(其中未长期规律服用抗高血压药的6例，长期规律 服用抗高血压药的8例)、正常血压(NT组)13例，取其切除的肠系 膜动脉加入裂解液提取总蛋白，BCA法测定提取的蛋白浓度。每孔上 兔抗人单克隆抗体(