骨骼肌缺血再灌注损伤及其肾损伤实验及.pdf

中文摘要 大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤及肾损伤的实验研究 摘 要 机体组织在急性缺血一段时间后，对组织代谢、结构和功能造成的损伤并 没有随着血流的恢复而恢复，而是不断加重，甚至出现了不可逆的损伤乃 至坏死的状态。骨骼肌缺血再灌注损伤在临床上很常见，且常常引起患者 的肌肉坏死和功能障碍，造成患者的残疾甚至危及生命。再灌注损伤不仅 可以导致局部组织第二次打击，还能导致远隔器官(如肾、肺等)的继发 性的损伤，有较高的致残率和致死率，成为血管外科、骨科、创伤外科急 需解决的问题。目前，临床上下肢缺血再灌注后最常见的并发症为骨筋膜 室综合症以及急性肾功能衰竭，严重影响治疗效果，影响着病人的生存期 限及生存质量。因此，研究骨骼肌缺血再灌注损伤的发病机理同时寻找更 加有效的治疗方法成为为广大医务人员的迫切任务。 近年来众多学者已经致力于研究骨骼肌缺血再灌注损伤的发病机制， 随着对炎症反应综合征研究的不断深入，发现了众多的炎症介质、白细胞、 血管内皮细胞是触发这一类损伤反应的关键，而氧自由基损伤，及细胞钙 超载，则处于上述系列炎症损伤的下游环节。针对损伤后防治的研究较多， 但真正能够适用于临床且效果明显的很少。缺血预处理目前被认为是减轻 缺血再灌注损伤最有效的方法之一。是1986年Murry等首次提出的内源 性心脏保护机制的概念，但由于心肌缺血发生时间的不可预知性，缺血预 处理在临床应用上受到很大的限制．相比之下，在再灌注期间实施的心脏 保护措施更具有临床可行性。2003年，Zhao等报道了另外一种内源性心 脏保护机制，即在较长心肌缺血后，在再灌注开始之前，立刻给予多个周期 的短暂停灌、复灌处理，具有与缺血预处理相似的心脏保护作用，并将此现 象称为缺血后处理。 药物预处理、后处理是最近提出的一种心肌保护的新策略，同传统的 缺血预处理及缺血后处理一样，药物预处理及后处理具有明显的心肌保护 作用，尤其是药物后处理是在缺血后进行的一种药物干预的治疗措施，更 具有实践性、科学性和伦理性，在心肌保护方面有着更重要的基础研究意 中文摘要 义和更为广泛的临床应用前景，有学者认为“药物后处理”可能会是心肌 缺血后处理临床应用的一个方向。本研究将缺血预处理、后处理及药物处 理引入骨骼肌缺血再灌注损伤的研究中，将有助于解决日益增多的下肢缺 血性疾病的治疗难题。 祖国的中医中药已被临床广泛应用于众多炎症反应性疾病，对再灌注 损伤的治疗取得了一定进展。血必净是由红花、赤芍、丹参、当归、JIl芎 5味中药提取物组成的复方的中药制剂，其有效成分主要为红花黄色素A、 川芎嗪、丹参素、阿魏酸、芍药苷等。这些成分的综合作用构成了血必净 的药理学基础；随着分子生物学技术的发展及中医理论现代化的进展，中 医学已逐步从I瞄床经验总结过度为基础实验研究，步入了实验医学的新时 代。因此针对血必净在骨骼肌缺血再灌注损伤的作用机制的研究被列入本 研究内容之中。 本课题从三方面进行了研究：(1)通过观察不同缺血时间下再灌注后 的骨骼肌组织学及超微结构的变化、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO) 的水平及骨骼肌水肿情况，探讨氧自由基及炎性细胞对骨骼肌缺血再灌注 及Real-timePCR技术研究骨骼肌缺血后不同再灌注时间内肾损伤情况， 的表达变化。(3)探讨了缺血预处理、后处理及血必净对骨骼肌缺血再灌 注肾损伤的影响及其作用机制。 第一部分大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤及其机制的实验研究 目的通过研究在不同缺血时间下再灌注后的骨骼肌变化情况、氧自 由基产生及炎性细胞浸润程度，以期进一步阐明骨骼肌缺血再灌注损伤的 作用机制，为临床治疗骨骼肌IRI提供理论依据。 方法健康清洁级wister雄性大鼠24只，制备后肢缺血再灌注损伤 模型，随机分4组，每组6只动物。对照组：仅进行常规麻醉，不阻断后 肢血流9h处理动物；实验1组；止血带完全阻断后肢血流2h，松解阻断 3h后处理动物。实验2组：止血带完全阻断后肢血流4h，松解阻断3h 后处理动物。实验3组：止血带完全阻断后肢血流6h，松解阻断3h后处 理动物。 应用HE染色和透射电镜技术观察骨骼肌损伤情况，并检测血清乳酸脱氢 2 中文摘要