绵羊卵母细胞及其体外早期胚胎中nNOS、eNOS、iNOS的表达.pdfVIP

摘 要 一氧化氮(Nitricoxide，NO)作为一种具有自由基性质的多功能活性分子，在 体内多种信号传递中起重要作用。体内的NO主要由一氧化氮合酶(NOS)催化产 由于NO的半衰期非常短而且极不稳定，而NOS是NO产生的限速酶，因此NOS 的表达量可以线性反映出NO的生成量。随着对NO的广泛研究，发现其与生殖存 在着必不可少的某些联系，特别在动物个体发育的早期。为了了解一氧化氮合酶 (NOS)的三个亚型在绵羊卵母细胞体外成熟及早期胚胎中的表达情况，本实验， 运用体外培养体系获得未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞及不同发育时期的早期胚胎 (2．细胞、4．细胞、8．细胞、桑葚胚、囊胚)，应用实时荧光定量PCR技术检测目标 基因nNOS、eNOS、iNOS相对表达情况。结果显示： 1．在绵羊未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和早期胚胎发育各阶段，nNOS、eNOS、 iNOS mRNA均有表达。 2．绵羊卵母细胞成熟过程中，nNOS mRNA相对表达量在未成熟卵母细胞期及 胞中的表达显著高于未成熟卵母细胞(p0．05)。 3．早期胚胎发育过程中，nNOS．iNOSmRNA相对表达水平显著高于eNOS的 表达(p0．05)，并且表达趋势相似，具体呈现出4．细胞期较2．细胞有降低趋势；8． 细胞期的表达量显著升高(p0．05)并在桑葚胚期达到最高；到囊胚期出现显著降 低(p0．05)的表达趋势。 研究结果揭示，NO可能参与调控绵羊卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程，尤 其在8．，细胞期到桑葚胚期这一特定阶段可能具有实质性的生理意义；并且在绵羊卵 母细胞成熟过程中的N0可能主要由nNOS介导，而早期胚胎发育过程中的NO可 能主要由州OS和iNOS共同介导调控。 关键词：NOS；体外培养；卵母细胞；早期胚胎；荧光定量PCR of andiNOSin and nNOS，eNOS SheepOocytes Expression inVitro Embryo Abstraot activemoleculewithfreeradical Nitric amultifunctional oxide州0)，as nature，plays all rolein oxide systems．Nitric importantsignallingmanyphysiological variousisoformsofNOShavebeen the ofNO，now identified， catalysesproduction neuronalnitrieoxide nitricoxide including synthase(nNOS)，inflammatory andendothelialnitricoxide thehalflife ofNOwas period very synthase(eNOS)．Since shortand wasa ofNO the enz