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第一章 菌种与种子扩大培养 重点：微生物工业对菌种的要求；生产用菌 种的保藏及选育；防止菌种衰退的措施 难点：工业微生物的培养类型 ③发酵周期短； ④菌株高产；对于胞外产品，细胞膜具有良好的渗透性，或者细胞膜的渗透性可以调节，细胞不易发生菌体自溶。 对于胞内产品，要求菌体易分离和收集，菌体易破碎； 对于基因工程菌，通常目的产物存在于包含体内，对于包含体，要求在细胞破碎时不易破碎，而在目的产物的分离提取时，则易破碎。 ⑤抗病毒（噬菌体）能力强； ⑥菌株性状稳定，不易变异退化； ⑦菌体本身不能是病原菌； 二、工业常用的微生物 从微生物分类学的角度，分为： 细菌类： 短杆菌：氨基酸发酵（谷氨酸） 枯草芽孢杆菌：淀粉酶（BF7658）、碱性蛋白 酶等 地衣芽孢杆菌：耐高温α-淀粉酶) 苏云金芽孢杆菌：BT生物农药 梭状芽孢杆菌：丙酮、丁酸等发酵 酵母菌： 啤酒酵母：酿酒酵母、辅酶类物质的发酵 酒精酵母：酒精 汉逊酵母：食品工业，用于乙酸乙酯的发酵 假丝酵母：scp生产，石油发酵 霉菌： 黑曲霉：柠檬酸工业、酿酒业、 酶制剂工业（糖化酶） 黄曲霉：酱油生产(3042)，面酱 青霉菌：青霉素的生产 红曲霉：红曲制造，用于南方红曲酒 （女儿红）的生产；使用红色色 素的生产；豆腐乳的生产等 赤霉菌：赤霉素的生产，是一种植物生 长激素 工业常用的微生物：细菌 工业常用的微生物：放线菌 工业常用的微生物：霉菌 三、生产菌种的保藏与选育 ㈠菌种保藏 （1）目的： ①存活，不丢失，不污染； ②防止优良性状丢失； ③随时为生产、科研提供优良菌种。 （2）基本原理：根据菌种的生理生化特点，人工地创造 条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态。 （3）常用的菌种保藏方法： 斜面低温保藏法、甘油低温保藏法、砂土保藏法、麸皮保藏法、冷冻干燥法、液氮超低温冻结法等。 几种常用菌种保藏方法的比较 划线培养后的细菌菌落 酿酒酵母 霉菌孢子 国内外菌种保藏机构： 菌种保藏机构的任务：广泛收集科研和生产菌种、 菌株，并加以妥善保管，使之达到不死、不衰、 不乱以及便于研究、交换和使用的目的。 菌种保藏机构： 中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM) 美国的典型菌种保藏中心(ATCC) 英国国家典型菌种保藏所（NCTC） 法国里昂巴斯德研究所（IPL） 工业微生物 / 农业微生物 / 四、菌种选育 （1）目的：改善菌种的特性，使提高产量，改进质量，降低成本，改革工艺，方便管理及综合利用等。 （2）方法：A、自然选育；B、抗噬菌体菌株选育；C、诱变育种；D、代谢控制育种；E、基因重组育种； 五、防止菌株衰退的措施 1、菌种退化：多次传代，发酵力、繁殖力下降；发酵产物得率低。 2、衰退的可能原因 ①菌种保藏不妥； ②培养要求未得到满足； 3.防止菌种衰退的方法 ①尽可能满足其营养条件、培养条件，避免有害因素 影响； ②尽量减少传代次数； ③采用幼龄菌种； 4.菌种复壮方法 ①分离复壮（稀释平板法、平板划线法等）； ②若单菌落分离不行，可改变培养条件，或两者结合进行复壮； ③诱变因素处理，再进行单菌落分离； 第二节 种子扩大培养 一、种子扩大培养的任务 1.任务：每次发酵罐的投料，要提供相当数量代谢旺盛的种子。根据菌种生长速度快慢来决定扩大培养的级数； 2、三级发酵（50吨发酵罐）： 斜面—一级摇床—二级种子罐—三级种子罐—发酵罐 二、工业微生物的培养类型 ⑴静置培养法（厌气性发酵）；少，如酒精发酵 ⑵通气培养法（好气性发酵）；主要，如抗生素等 通气培养法作为种子扩大