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第二章 工业微生物资源 ——生产菌种的来源 第二章 工业微生物资源 学习目的与要求： 了解重要的工业微生物资源的获得途径，常用的菌种保藏方法，掌握筛选工业发酵菌种应考虑的重要指标；微生物筛选（选择性）分离的原理；菌种的退化、复壮原理 。 重点：菌种的保藏,重要工业微生物的分离、菌种的退化、复壮 。 难点：重要工业微生物的分离 基本内容 第一节? 工业菌种的保藏 第二节??重要工业微生物的获得 第三节 微生物筛选（选择性）分离的原理 第四节 菌种的退化、复壮 1．American Type Culture Collection ， ATCC (美国典型菌种保藏中心) ATCC是综合的保藏机构，亦出有保藏目录，发行全世界。 除各大类微生物外还保藏细胞株等。 2. Northern Utilization Research Branch，U.S Department Agriculture， NRRL（美国农业部北部研究分所） 与ATCC同为美国有名的菌种保藏机构。 3. Centra-albureau Voor Schimmel cultures,CBS （荷兰菌种保藏中心） 以保藏Fugi为主。 4. Academic Science，AS（中科院菌种保藏中心） AS是综合保藏机构，同时编有菌种目录 Bacteria ： AS1.000； Yeast ： AS2.000； Mould ： AS3.000； Actinomycetes：AS4.000； 5.?中科院林业土壤研究所菌种资源组 菌种编号为： Bacteriac：B1.000； Actinomycetes：A1.000； Yeast ：Y1.000； Mould ：F1.000； （一).???? 实验室最常用的保藏方法 （二).???? 我国菌种机构的保藏法： 1、冰箱保藏法： 在固体斜面上定期移植传代（4--5℃）。 2、 石蜡油封藏法： 室温下或冰箱中。 3、 冷冻干燥法：一般温度愈低则保藏效果越好。液氮温度（-195℃）比干冰温度（-70℃）好， -70℃又比-20℃、4℃要好。 第二节??重要工业微生物的获得 微生物工程的工业生产水平由三个要素所决定， 生产菌种的性能 发酵及提纯工艺条件 生产设备 其中优良的菌种是最重要的。 1、环境中含有无数的微生物，但其中很少是您满意的，且从环境中分离很费事，须经大量研究和改造后，方能发现和获得优良菌种（节省钱，适合中国国情）。 理想的分离步骤是从土壤环境开始的，土壤中富于各种所需的菌。设计的分离步骤应有利于具有工业重要特性的菌的生长，如加入某些对其他类型菌生长不利的化合物或采用选择性培养条件。 2、保藏机构可以提供已知特征的微生物，但不一定包含所希望得到的特征，所以需经过筛选。但是工业微生物学者也可从菌种保藏委员会中索取。尽管购买菌种的性能一般比较弱，但可作为模型来改良和发展，然后再用于评定天然分离株。 3、 购买菌种可以省时省力，但工业上真正有价值的菌种，国（内）外机构往往要价苛刻。 例Ⅰ：某味精厂打算买日本的谷氨酸生产菌菌种，日方要价300万美元，还需从产值中提成5%； 例Ⅱ：我国转让给瑞士罗士公司的VC二步法发酵新工艺，包括菌种，售价550万美元。 二、筛选所需菌株时宜考虑的重要指标 （一）作为工业发酵菌种的前提 值得注意的是，我们要求获得高产菌株的同时，还应考虑： ①???? 纯培养 ②???? 无毒菌株 ③???? 产品无毒 ④???? 推广大生产过程时的经济效益； （二）优良的生产菌种应具有的重要特性 一个菌种能否满足工业生产的实际需要，是否有工业生产价值是极为重要的。工业生产实际对生产菌种自身的特性提出了许多要求，这些要求也就成为了评价生产菌种优劣的标准和菌种选育工作的研究目标。 一般来说，优良的生产菌种应该具备如下的基本特性（或在筛选所需菌株时宜考虑的一些重要指标） 1、菌种营养特性优良（营养要求不苛刻） 1）在发酵过程中，常会遇到要求用廉价的培养基，这样可以降低生产成本，提高产品的市场竞争力。如用甲醇作为能源，一般用含有这种成分的分离培养基便筛选出能适应这种养分的菌种。又如使用天然纤维素材料做培养基。 2）有利用广泛来源原材料的能力，并对发酵原料成分的波动敏感性较小。使发酵可以采用价格便宜、