丙酮酸乙酯对大鼠脑出血神经元的保护机制实验及研究.pdf

目 录 1 丙酮酸乙酯对大鼠脑出血神经元保护机制的实验研 究………………………………………………………………1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………3 1.3 前言……………………………………………………………5 1.4 材料与方法……………………………………………………7 1.5 结果……………………………………………………………15 1.6 讨论……………………………………………………………28 1.7 结论……………………………………………………………37 1.8 参考文献………………………………………………………38 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………45 2 致谢……………………………………………………………46 3 丙酮酸乙酯在神经系统疾病的研究进展（综述） …………………………………………………………………47 丙酮酸乙酯对大鼠脑出血神经元保护机制的实验研究 摘 要 目的：本课题研究丙酮酸乙酯处理脑出血大鼠对大鼠神经元的保护作 用，实验通过监测大鼠血清自由基NO、SOD，炎症因子TNF-a、IL-6 以及 凋亡细胞，凋亡调控蛋白Bax、Bcl-2 的表达三个方面来探讨丙酮酸乙酯对 大鼠脑出血神经元的保护机制，为临床治疗提供新的思路。方法：运用脑 立体定位仪将自体动脉血注入大鼠脑尾状核制备脑出血模型。清洁级雄性 SD 大鼠48 只，体重300g～350g 之间，随机分为三组，假手术组（F 组） （n=8），脑出血组（ICH 组）（n=20），脑出血+丙酮酸乙酯干预组（EP 组） （n=20）。每组按断头时间不同分为6h、24h、3d、7d 共4 个亚组。EP 组 用Ringer’s 液配制浓度为1mg/ml 的丙酮酸乙酯，以40mg/kg 注入大鼠腹 腔，F 组及脑出血组用等量生理盐水代替，术后2h 给药，然后每天给药一 次至动物处死，采用神经行为学评分（Longa 法）判断造模是否成功。各 时间点大鼠采用Garcia 评分了解神经功缺损情况，制备血清，采用比色法 测定血清NO、SOD 含量，采用酶联免疫法（ELASA）测定血清TNF-a、IL-6 含量。采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织不同部位Bax、Bcl-2 的表达量， 同时运用原位末端标记法（TUNEL 法）观察血肿周围细胞凋亡情况。结果： 脑出血后大鼠神经功能缺损评分较假手术组大鼠低（P0.05）；血清TNF-a、 IL-6、NO 表达量升高（P0.05），出血后6h 开始增加，3d 升高最为明显； 血清SOD 从出血6d 开始减少，直到出血3d 最明显（P0.05）；出血后脑 细胞凋亡数目升高，凋亡调控蛋白Bax、Bcl-2 表达量增多 （P0.05）。EP 组大鼠神经功能缺损评分较出血组大鼠升高（P0.05）,血清TNF-a、IL-6、 1 NO 含量较出血组也明显降低，SOD 含量升高（P0.05），血肿周围凋亡细胞 数目较出血组减少，凋亡调控蛋白Bcl-2 表达量增多，Bax 蛋白表达量减 少（P0.05）。结论：1、脑出血后大鼠神经功能受损，血清炎症介质及自 由基表达量增多，细胞凋亡数目增多。2、EP 能抑制脑出血大鼠的炎症反 应和自由基的氧化损伤，改善神经功能缺损评分。3、EP 治疗抑制大鼠神 经元凋亡，其作用可能是上调凋亡调控蛋白Bcl-2 的表达，并下调Bax 表 达来完成的。 关键词：脑出血 丙酮酸乙酯 自由基 炎症因子 细胞凋亡 2 Protection mechanism for Ethyl pyruvate on hemorrhage rats neuron ofexperimental research Abstract: This topic research ethyl pyruvate treatment of cerebral hemorrhage rat neurons of rat protection, experimental rat