ERK1%2fERK2、p38MAPK在肺挫伤复合内毒素血症早期所致肺炎症反应中的作用的分析.pdf

早期所致肺炎症反应中的作用研究 摘 要 ALI／ARDS是平、战时创伤和现代道路交通伤导致病人死亡的主要原 因之一。肺挫伤和脓毒血症是诱发ALI／ARDS的两个主要危险因素。目前 认为，由活化的肺泡巨噬细胞(AM)、多形核粒细胞(PMN)等免疫细胞和众 多炎性介质介导的异常炎症反应是严重创伤和感染导致肺损伤的重要发病 机理‘控制这种异常炎症反应是减轻肺伤害、保护肺功能和改善ALI／ARDS 预后的关键所在。膨 f 主要成员，研究显示两个蛋白激酶参与了细胞外炎症、应激等信号的细胞 内转导过程。／／，D 为了了解ERKl／ERK2、p38MAPK在创伤后早期肺炎症反应中的作用， 本研究主要进行了以下四个方面的工作：(1)复制了大鼠肺挫伤、内毒索血 症和肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型，并建立了稳定的AM体外培养方 法；(2)观察了肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型的肺损伤程度和早期肺炎 症反应水平，并对三个模型的肺损伤程度和肺炎症反应水平进行了比较性 研究；(3)利用免疫印迹分析、免疫沉淀、激酶分析和逆转录聚合酶链式反 性变化，观察了炎症反应有关主要细胞因子的基因表达变化；(4)观察了内 毒素作用下AM分泌炎性介质水平变化，重点观察了EIⅨl／ERK2和 p38MAPK活化抑制剂对AM分泌炎性介质的调控作用。 ／主要结果与结论： 1．应用小型生物撞击机(驱动压=350l【Pa)进行胸部撞击复合静脉注射 内毒素(5mg／kg)建立了肺挫伤复合内毒素血症肺损伤模型，该模型稳定性 V 强，适用于创伤、感染导致ALI相关研究。 2．肺挫伤、内毒素血症肺损伤及肺挫伤复合内毒素血症肺损伤早期均 存在明显的肺内炎症反应，肺损伤程度越严重，肺内炎症反应越明显，预 后也就越差。 3．由肺挫伤导致的肺伤害，除了生物力学机制产生的原发肺损伤外， 致伤后早期发生的肺内炎症反应可能是肺挫伤后Au的重要发病机制。 达和活性出现明显增加，创伤后肺炎症反应越明显、肺损伤程度越严重， 两个蛋白激酶的活化表达增加也越明显。提示肺炎症反应和肺损伤过程可 能与两个信号通路的活化存在内在联系。 5．地塞米松对肺挫伤复合内毒素血症早期所致的肺炎症反应产生明显 下降，地塞米松预处理产生了更明显的抑制作用。本结果从另一个角度说 症反应的内在调控过程。 ALI具有治疗作用的机制之一。 合我室以往关于内毒紊作用AM分泌炎性介质的时效和量效性的研究结果， 控机制。 TNF a、IL．6、NO和TXA2的水平发生变化。提示，两条通路不同程度的 活化程度可影响以上介质的产生水平，从而，证实了两激酶信号通路参与 了AM炎症反应的内在调控机制。 细胞因子TNFo和IL．6产生抑制作用的同时，对抑炎性细胞因子IL．10的 基因转录和与因子分泌无明显影响．提示，AM在内毒素作用下合成与分泌 VI 由于IL．10具有明显的抑炎作用，结合本实验结果说明存在通过干预 症反应失衡的可能性·k 关键词：．肺{凡肺损伤；肺挫伤复合内毒素血症；炎症反应；ERKl／ERK2 ， ／ p38MAPK；肺泡巨噬细胞： 98059；SB203580,)翔胞因子。 一氧化氮：血栓素； VII ERKl／ERK2and MAPKinaseon Roleof p38 Pulmonary attheEarlierof InflammatoryResponse StageLung Endotoxemia ContusionCombinedwith Abstract A