鸡精原细胞分离纯化与体外初步培养.pdf

梯度离心和体外贴壁培养纯化鸡精原细胞，能获得较高的精原细胞纯度。 3．本研究分别比较了percoll分离前、后精原细胞在有、无饲养层条件下的培 养情况，结果显示：①在有饲养层条件下，未经pereoll分离的精原细胞悬液体外 培养5h后，精原细胞开始贴壁；接种24h后，贴壁的体细胞已铺展成不规则形状， 而贴壁的精原细胞仍呈圆形。接种48h后，精原细胞开始缓慢增殖，培养体系中 多个一串或一团的精原细胞显著增多：接种96h后，少数精原细胞逐渐脱离支持 细胞和饲养层细胞，随换液而被弃去。培养1周之后，精原细胞开始缓慢的退化， 但数量却没有明显的减少，在体系中维持着动态的平衡。②无饲养层条件下，睾 丸细胞悬液接种6h左右，少数精原细胞开始贴壁；培养24h后，贴壁的支持细胞 已开始铺展成不规则形状，精原细胞仍呈圆形敖在地镶嵌于支持细胞层之上；培 养48h后，已有两个一串的精原细胞出现，但数量较少；培养72h后，2个或多个 一串的精原细胞开始增多，但同时游离的精原细胞也增多；培养5d，大部分精原 细胞已脱离支持细胞。结论：无论有、无饲养层的存在，percoll分离前的精原细 离前有饲养层条件下精原细胞贴壁速度和体外存活时间最快和最长。 关键词：鸡；精原细胞；分离；纯化；体外培养 andCulture