《Agilent1100液相基本操作步骤》.doc

Agilent1100液相基本操作步骤 (一)、开机： 1、打开计算机,进入Windows NT （或Windows 2000）画面,并运行Bootp Server程序。 2、打开 1100 LC 各模块电源。 3、待各模块自检完成后，双击Instrument 1 Online1100LC通讯，进入的工作站画面如下所示。 ? 4、从“View”菜单中选择“Method and Run control, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”，“Show status toolbar”，“System diagram”,”Sampling diagram” 5、把流动相放入溶剂瓶中。 6、打开Purge 7、单击PumpSetup pump选项，进入泵编辑画面。 8 、设Flow：5ml/min，单击OK。 9、单击PumpPump control选项，选中On，单击OK，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。 10、单击Pump图标，出现参数设定菜单，单击Pump Control选项，选中Off，单击Ok关泵， 关闭 Purge valve。 11、单击PumpSetup pump选项，进入Pump编辑画面，设Flow：1.0ml/min。 12、单击泵下面的瓶图标，如图所示（以二元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积。单击Ok。 ? ? 1、开始编辑完整方法： Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Data analysis Ok，进入下一画面。 2、方法信息： ??Method Comments”中加入方法的信息（如：方法的用途等）。Ok 进入下一画面。 ?3、泵参数设定： 在“Flow”处输入流量,如1ml/min，在“Solvent B”处输入70.0,(A=100-B) ,也可Insert 一行”Timetable” ,编辑梯度。在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。 Ok进入下一画面。 4、自动进样器参数设定:, 如图所示，进样体积 1.0ul ,洗瓶位置为6号。“Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injector program”---可以点击Edit 键进行进样程序编辑。?点击Ok进入下一画面。 ? 5、柱温箱参数设定: ● 在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more” ,如图所示,选中”Same as left”---使柱温箱的温度左右一致。 点击ok进入下一画面。 6、VWD检测器参数设定: 在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在”Peak width (Response time)”,选择合适的响应时间, 如0.1min (2s)。 在Timetable 中可以“Insert”一行，输入随时间切换的波长，如1min =300nm。点击ok进入下一画面。 7、DAD检测器参数设定:检测波长: 254nm,BW=30nm, 参比波长=350nm,BW=100nm; 检测波长：一般选择最大吸收处的波长。样品带宽BW： 一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit— ● 点击Ok进入下一画面。 8、RID检测器参数设定: 色谱条件: : 20ul 。 光学单元温度: Off 。 : 正 。 峰宽(响应时间) : 4s 。 如图所示: “Optical Unit Temperature”---若环境温度控制在±2℃,设定为Off, ,则设定光学单元温度为高于环境温度5度,以防样品在池中沉淀。“Peak width”---大多数分析设为4S，只有在高速分析下设为更短。“Automatic recycling after analysis”---在不进行分析时可以让流动相循环，节省流动相，检测器连续运行，可随时投入使用。 **