H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白抗原性差异及研究.pdf

摘 要 高致病力H5N1亚型禽流感的暴发不仅给世界养禽业造成巨大打击，而且给人类健康带来严 重威胁，对于该病的防制具有重要的公共卫生学意义。疫苗免疫接种是防制高致病性H5NI弧型 禽流感的重要手段，但禽流感病毒像所有的RNA病毒一样在传播过程中非常容易发生变异，使 疫苗株与感染的病毒之间抗原差异较大而不能有效保护家禽。已知禽流感病毒的毒力和抗原性与 其HA蛋白有密切关系，因此要控制禽流感首先要对毒株之间HA抗原性的差异进行研究。 为此，本研究选用了4个不同年代、不同分离地点的毒株(CC毒株是04年分离于广东地区、 GD毒株是96年分离于广东地区、OVV毒株是04年分离于东北地区、YC毒株是05年分离于东 到pFastBacHTA杆状病毒转座载体上，经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体，将其转化 蛋白质电泳，免疫印迹法、血凝试验和血凝抑制试验分析表明：分子量约63Kd重组血凝素蛋白 在sf9昆虫细胞中实现了高效表达。具有良好的血凝话性；而且其血凝活性能够被H5NI禽流感 病毒高免血清所抑制，说明表达的重组蛋白具有与天然蛋白相似的生物活性。 然后将所表达4种HA蛋白定量，用佐剂乳化后制成禽流感基因工程亚单位疫苗分别免疫l 组3周龄SPF鸡。并在免疫后!-5周和攻毒后3周分别翅静脉采血