刺球状羟基灰石颗粒对mc3t3-e1的细胞毒性研究.pdfVIP

Classified Index ： CODE ：10075 U.D.C. ： NO A Dissertation for the Degree of M. S The Study of in vitro Cytotoxicity of Bur-like HAP Microsphere on the MC3T3-E1 Cells Candidate: Cheng Gong Supervisor: Prof. JinChao-Zhang Academic Degree Applied for: Master of Science Specialty: Organic Chemistry University: Hebei University Date of Oral Examination: June, 2014 摘 要 摘 要 羟基磷灰石材料已经广泛的应用在了生物医学领域，但是其生物相容性的研究尚不 完善，本文合成了具有晶格缺陷发光性质的刺球状羟基磷灰石颗粒(BHA)，以MC3T3-E1 细胞为模型，在SEM 和XRD 表征基础上，通过四甲基偶氮唑蓝法(MTT)、流式细胞术、 细胞器共定位、AO/EB 双染法、单细胞凝胶电泳等方法，分别从细胞活力，细胞凋亡， DNA 损伤状况，活性氧水平，线粒体膜电位，溶酶体通透性等角度对BHA 的体外细胞 毒性进行了评价。主要研究结论如下： 1．通过观察SEM 照片和共聚焦显微镜照片，结合摄取实验的结果，可知BHA 颗 粒未被MC3T3-E1 细胞摄取。进入细胞的为BHA 颗粒上脱落下来的碎片。且碎片进入 细胞的方式主要为胞饮以及网格蛋白介导的内吞作用。BHA 的碎片被摄取之后主要定 位于线粒体与溶酶体中，并进一步通过影响活性氧水平、线粒体和溶酶体膜的通透性进 而对细胞产生毒性作用。 2 ．BHA 颗粒可抑制MC3T3-E1 细胞的活力，阻滞细胞周期于S 期，促进细胞凋亡 和坏死，造成DNA 损伤。 3 ．BHA 颗粒对细胞毒性的影响与其碎片含量有一定关系，碎片含量的增加，可进 一步导致细胞活力的抑制及活性氧水平的升高。 关键词 刺球状羟基磷灰石 碎片 MC3T3-E1 细胞毒性 摄取 Ⅰ Abstract Abstract Hydroxyapatite materials have been widely used in the biomedical field, but the research about biocompatibility of HAP materials is not perfect. In this paper, Bur-like HAP Microsphere (BHA) have been synthesized by a facile hydrothermal process, and the physical and chemical properties of Bur-like HAP Microsphere (BHA) were characterized by SEM and SEM. In order to investigate the cytotoxicity of BHA, MC3T3-E1 were incubated with different concentration o