功能化小分修饰的聚磷酸酯共聚物用于药物和基因载体.pdfVIP

功能化小分子修饰的聚磷酸酯共聚物用于药物和基因载体 中文摘要 摘 要 聚磷酸酯（Polyphosphoesters ，PPEs ）是一类具有优异的生物相容性和生物可 降解性的聚酯。聚磷酸酯主链含五价磷原子，侧链可修饰上多种功能基团，能够调 节聚合物的水溶性，同时向聚合物中引入具有生物活性的小分子。此外，在酸、碱 以及磷酸酯酶的存在下，聚磷酸酯可以快速水解，水解产物不会改变局部组织的pH 环境。以上优异性能使聚磷酸酯在生物医药领域获得越来越多的重视。 本论文采用开环聚合法（ROP ）合成了具有生物相容性和生物可降解性的聚磷 酸酯共聚物，并采用紫外光诱导的巯基-烯（thiol-ene ）点击化学反应，对聚磷酸酯 侧基的碳碳双键进行加成，向聚合物侧链引入生物活性小分子。对聚合物的化学结 构和性质进行了表征，并将聚合物用作疏水性抗癌药物的载体，研究了相关性能。 本论文的工作内容主要分为以下三个部分： (1) 以苄醇（BzOH ）作为引发剂，在辛酸亚锡[Sn(Oct) ]的催化下，引发环状磷 2 酸酯单体 2-丙烯酸乙酯氧基-2-氧代-1, 3, 2-二氧磷杂环戊烷（OPEA ）和- 己内酯 （-CL ）进行开环聚合反应，得到无规共聚物poly(CL-co-OPEA) ；利用thiol-ene 方 法，选用 3-巯基丙酸为巯基试剂，对聚磷酸酯的侧基双键进行加成，得到侧基带有 羧基的 poly(CL-co-OPEA-COOH) ；在 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 （EDC ）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS ）存在的条件下，poly(CL-co-OPEA-COOH) 的侧 基羧基与半乳糖胺发生酰胺化反应，得到最终产物 poly(CL-co-OPEA-Gal) 。通过核磁 共振氢谱（1 31 H NMR ）、核磁共振磷谱（ P NMR ）和凝胶渗透色谱（GPC ）测试， 证 明 成 功 地 制 备 了 无 规 共 聚 物 poly(CL-co-OPEA) ， 1H NMR 验 证 了 poly(CL-co-OPEA-COOH)和 poly(CL-co-OPEA-Gal) 的化学结构。通过 3-(4, 5-二甲基噻 唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐（MTT ）试验表征共聚物的细胞毒性，结果表明共聚物 在修饰前后均具有良好的生物相容性。 (2) 半乳糖胺修饰的无规共聚物poly(CL-co-OPEA-Gal)用于运载抗癌药物阿霉素 （DOX ）的相关性能研究。poly(CL-co-OPEA-Gal)是两亲性聚合物，能够在水溶液中 I 中文摘要 功能化小分子修饰的聚磷酸酯共聚物用于药物和基因载体 进行自组装形成聚合物胶束，其中，PCL 单元呈疏水性，能够在组装时形成胶束的 核，而亲水性聚磷酸酯单元则形成壳舒展在胶束外部。由于聚合物具有良好的生物 相容性并且修饰有肝靶向性的半乳糖胺，聚合物胶束可以进一步用于包载抗癌药物 阿霉素，形成具有肝靶向性的纳米载药体系。poly(CL-co-OPEA)未经肝靶向小分子 修饰，可以作为对照组进行载药以及后续表征实验。使用透射电子显微镜（TEM ） 和动态光散射（DLS ）对聚合物空白胶束、聚合物载药胶束的粒子形貌、粒径大小 及粒径分布进行表征。药物释放试验对载药胶束在中性和弱酸性条件下的药物释放 曲线进行对比，发现该纳米载药体系具有一定的环境敏感性。通过活细胞工作站和 流式细胞仪对载药胶束的细胞内化过程进行详细研究，证明半乳糖胺修饰的载药胶 束能够通过受体-配体相互作用进入肝癌细胞，具有显著的靶向性。同时，细胞毒性 测试表明半乳糖胺修饰的载药胶束能够有效地抑制人肝癌细胞（HepG2 cells ）增殖， 也进一步验证了其对肝癌细胞的靶向性。 (3) 以Sn(Oct) 为催化剂，利用甲氧基封端聚乙二醇（MePEG2000