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2015届高考生物二轮复习:专题九 现代生物科技专题 课时冲关练(十六).doc
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课时冲关练(十六)
基因工程、细胞工程
(45分钟,100分)
1.(12分)(2014·福建高考)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:
(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的 。
(2)步骤②中,重组胚胎培养到 期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的
设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
【解析】(1)步骤①是核移植过程。体细胞核移植前要除去受体卵母细胞的细胞核,原因是若不去掉卵母细胞的细胞核,就会造成细胞里面有两个细胞核,使得遗传物质不稳定。
(2)ES细胞是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。
(3)步骤③为获取目的基因,并把目的基因导入受体细胞的过程。在生物体外可通过PCR技术扩增目的基因,其条件是模板DNA、根据Rag2基因的核苷酸序列设计的引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶等,另外根据题干可知,获得Rag2基因需要用HindⅢ和PstⅠ限制酶,所以在构建表达载体时,所选择的表达载体上应具有HindⅢ和PstⅠ酶的酶切位点。
(4)检测目的基因是否翻译相应蛋白质时,应采用抗原—抗体杂交(免疫)法,即提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原—抗体杂交,看是否有杂交带。
答案:(1)细胞核 (2)囊胚
(3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质
2.(14分)(2014·新余二模)普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因(用A表示),控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄易软化,不耐储藏。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳糖醛酸酶,从而使番茄长时间抗软化,容易储存和运输。下图是通过基因工程培育抗软化、耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题:
(1)普通番茄(AA)也可以通过 育种的方法,最终获得基因型为aa(不能合成多聚半乳糖醛酸酶)的抗软化、耐储藏的番茄。
(2)利用基因工程将目的基因导入植物细胞,目前采用最多的方法是 ,该方法中用到的目的基因表达载体是 ,目的基因需插入该基因表达载体的 上。
(3)将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞所需要的工具酶有
。
(4)图1中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞,需要经过
技术获得转基因番茄,这个过程需要在 条件下进行,细胞先经脱分化形成 ,再形成丛芽和根。
(5)根据图2分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的mRNA ,从而阻断了 过程。
【解析】(1)要想利用普通番茄(AA)获得基因型为aa的抗软化、耐储藏的番茄,可以采取诱变育种的方法,使A基因突变成a基因,从而获得所需要的品种。
(2)目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法;农杆菌中的Ti质粒是目的基因表达载体;Ti质粒上的T-DNA能转移到受体细胞并且整合到其染色体DNA上,因此目的基因必须插入T-DNA中。
(3)基因工程的工具酶有限制酶和DNA连接酶。
(4)由一个植物体细胞得到一个植物个体,必须采用植物组织培养技术;植物组织培养技术需要在无菌条件下进行;先经过脱分化形成愈伤组织,再经过再分化形成丛芽和根。
(5)从图2可以看出多聚半乳糖醛酸酶基因和抗多聚半乳糖醛酸酶基因转录出来的mRNA能够互补配对形成双链RNA,从而阻断了多聚半乳糖醛酸酶基因的表达过程(翻译过程)。
答案:(1)诱变
(2)农杆菌转化法 Ti质粒 T-DNA
(3)限制酶和DNA连接酶
(4)植物组织培养 无菌 愈伤组织
(5)互补结合形成双链RNA 多聚半乳糖醛酸酶基因的表达
【知识总结】目的基因导入受体细胞的种类及方法
植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注
射技术 感受态细胞法(用Ca2+处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 3.(12分)(2014·天水三模)应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题:
(1)②过程常选取牛的
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