PCR技术在快速检测沙门氏菌中应用.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2012年，第 31卷，第 1期，第 90—94页 GenomicsandAppliedBiology，2012，Vol-31，No．1，90—94 技术主题 TechnologyFeature PCR技术在快速检测沙门氏菌中的应用 沈兰 王锐萍 史海涛 庞贤鹏 海南师范大学生命科学学院，海 口，571158 通讯作者，wrp@hainnu．edu．cn．haitao—shi@263．net 摘 要 本文总结了PCR检测沙 门氏菌过程中被检 目标基因的选择、引物的特异性 以及 国内外检测沙 门氏 菌的一些实例，分析了PCR检测沙 门氏菌在引物选择上存在的问题，简述了在传统PCR技术基础上发展起 来的检测沙 门氏菌新方法 。 关键词 沙 门氏菌，被检 目标基因，引物特异性，PCR技术 ApplicationsofPCRTechnologiesonRapidDetectionofSalmonella ShenLan W angRuiping ShiHaitao PangXianpeng Cen~eforViticulture Enology，CollegeofLifeSciences，HainanNormalUniversity，Haikou，571158 Correspondingauthors，wrp@hainnu．edu．cn，haitao—shi@263．net DOI：10．3969／gab．031．000090 Abstract Thispapersummarized thetargetgeneselectionandprimerspecificity in thePCR proceduresof Salmonelladetection．Somepracticalcasestudiesathomeandabroadwerelistedasexamples．W ealsoanalyzed theproblemshappenedonprimerchoosingin thePCR detection ofSalmonellaand introducedsomemodified approachedforSalmonelladetectiondevelopedbasedontraditionalPCR technologies． Keywords Salmonella,Targetgene，Primerspecificity,PCRtechnique 传统的沙 门氏菌检测方法是 以表面抗原为基 PCR检测 ，如编码 O抗原基 因，编码 H抗原基 因，编 础，依靠生化反应和血清学实验进行检~,jl(Sheneta1．， 码 vi抗原的基因，与沙门氏菌致病性有关的基因以及 201l1，具有检测周期长、所需试剂繁多、费时及敏感 其它基因等，根据检测 目的，可选择对不同基因进行 性低等缺陷。随着分子生物学技术的不断发展和进 检测，从而达到在不同水平上检测和鉴定沙 门氏菌。 步，针对沙 门氏菌开展的快速检测方法得到迅速发 1．1沙门氏菌属的检测 展，现代分子生物学技术如核酸杂交技术、限制性片 段长度多态性分析(RFLP)、核苷酸序列分析和聚合 1．1．1编码组氨酸操纵子基因的检测 酶链式反应(PCR)技术等，己经在沙 门氏菌的准确、 组氨酸操纵子是细菌中控制组氨酸降解为可利 快速检测和鉴定中起重要的作用。 用碳源和氮源的遗传单位。黄金林等(2002)根据沙门 应用PCR技术检测沙门氏菌，主要集 中在快速 氏茵组氨酸转运操纵子基 因序列设计 PCR引物 ，成 检测体系的建立和检测灵敏度的提高上，其核心是 功扩增出495bp的沙门氏菌特异条带，从而建立了 选择被检 目标基因。本文概述了PCR技术在检测沙 应用PCR进行沙 门氏菌快速检测的方法，并研制成 门氏菌过程 中目标基因的选择、存在的问题 以及其它 适合临床应用的检测试剂盒，通过对粪便、水、饲料 检测沙 门氏菌的技术与手段 。 和畜产品等样品的沙门氏菌检测，与传统检测方法 的特异性和敏感性一致。陈晓玲等(2009)~i]用组氨酸 1沙 门氏菌被检 目标基 因选择及 PCR检测